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猪蛔虫感染期幼虫差异表达基因的鉴定和全长cDNA的克隆与分析的开题报告

一、选题目的：

猪蛔虫是一种寄生虫，其成虫寄生在猪胃肠道内，会引起猪体内寄生虫感染病。具体地说，在幼猪肠道中，蛔虫卵在未经消化的情况下进入小肠和吸收和运输养分的器官中（如肝脏、肺部和小肠），并继续在这些器官中孵化和生长。这一过程不仅对幼猪动物的健康产生负面影响，还会导致食品安全问题。因此，研究幼虫感染期猪的分子机制对于控制疾病和提高生产效益具有重要意义。

本课题旨在通过筛选和鉴定幼猪体内感染蛔虫期间相对过度表达的基因，找出相关病理过程中的关键基因。除此之外，全长cDNA的克隆和分析可以为进一步研究猪蛔虫生长和发育提供基础信息。

二、研究方法：

1.RNA提取：从感染猪的小肠、肺和肝组织中提取总RNA，获取样本RNA的天然状态和高质量RNA。

2.降解RNA避免：使用DNaseI对RNA进行消化，去除DNA污染物。

3.逆转录反应：通过逆转录反应将RNA转化为cDNA，为基因表达分析做准备。

4.滴定反应：利用量表技术对每个组中包含的cDNA数量进行准确测量。

5.Real-timePCR分析：通过fluorescence-basedmethod检测目的基因的表达，将结果与内参基因比较以确保分析的准确性。

6.全长cDNA的克隆与分析：cDNA文库构建和筛选，PCR扩增，亚克隆克隆和测序分析。

三、预期结果：

通过上述方法，本研究预计鉴定和分析感染期幼虫的差异表达基因，并在全长cDNA上克隆和分析相关基因和编码物。结果有望为研究猪蛔虫生长和发育提供新的基础信息，并为疾病控制和食品安全保障提供依据。