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表达猫粒细胞集落刺激因子的重组大肠杆菌工程菌株的构建方法,属于重组工程菌株领域,该方法包括以下步骤:合成rfG‑CSF优化基因;将制备的pUC57‑rfG‑CSF质粒和pColdI质粒进行双酶切,回收纯化目的片段连接后构建重组原核表达质粒并转化大肠杆菌Rosetta(DE3)表达感受态细胞;将鉴定正确的重组大肠杆菌工程菌株诱导表达后,超声破碎菌液,离心收集上清和沉淀;将获得的rfG‑CSF包涵体经洗涤、溶解、纯化后获得rfG‑CSF原液;将纯化的rfG‑CSF原液进行梯度透析复性。本发明所表达
(19)国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号CN117384930A
(43)申请公布日2024.01.12
(21)申请号202311349601.9C07K1/34(2006.01)
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