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microRNA128-b对A549细胞EGFR表达调控的研究的开题报告

一、研究背景

肺癌是当前全球范围内最常见的恶性肿瘤之一，也是导致癌症死亡率居高不下的原因之一。EGFR是一种表达在许多恶性肿瘤中的重要分子，EGFR的过度表达与肺癌的发生、转移和恶化密切相关。microRNA是一类约20-23个核苷酸长的小RNA，具有调节基因表达的作用，其中microRNA128-b被发现具有调控肺癌细胞EGFR表达的作用。因此，从探究microRNA128-b调控A549细胞EGFR表达这一角度展开的研究具有十分重要的意义。

二、研究目的

本次研究旨在探究microRNA128-b对A549细胞EGFR表达的调控作用，从而深入了解肺癌细胞的生长和转移机制，为开展治疗肺癌的相关研究提供理论和实验基础。

三、研究方法

1.细胞培养

本研究采用人类肺腺癌细胞株A549进行相关研究，采用RPMI1640培养基进行细胞培养。将A549细胞分为实验组和对照组，实验组细胞分别以microRNA128-b质粒及空质粒转染，对照组则以未转染的A549细胞为对照。

2.转染

将microRNA128-b质粒和空质粒转染至不同组别的A549肺癌细胞中，采用荧光素酶检测法及实时荧光定量PCR验证转染效率和稳定性。

3.Westernblot分析

采用Westernblot法分析不同组别A549细胞EGFR、pEGFR、ERK和pERK的蛋白表达水平，从而比较microRNA128-b是否能够调控A549细胞EGFR表达。

4.免疫荧光细胞染色

采用免疫荧光细胞染色技术对A549细胞的EGFR蛋白表达水平以及细胞形态进行观察，并进行细胞生长实验，探究microRNA128-b的作用。

四、研究意义

本研究不仅有助于深入了解肺癌的发生和转移机制，同时也为肺癌治疗提供了理论和实验基础。如果成功探究出microRNA128-b对肺癌细胞的调控机制，那么有可能为开发治疗肺癌的新方法提供理论支持，并为开发新的药物和治疗策略奠定基础。