遗传信息的表达和调控.pptVIP

大纲中心法则λ噬菌体思考题1乳糖操纵子的结构三个结构基因Z基因：编码β-半乳糖苷酶（β–galactosidase），分解乳糖成为半乳糖和葡萄糖；Y基因：编码透酶（pormease），使外界乳糖等透过大肠杆菌细胞壁进入细胞内；A基因：编码乙酰基转移酶（acetylase），能将乙酰CoA上的乙酰基转移到半乳糖上，形成乙酰半乳糖。三个调节序列：在结构基因的上游还有一个启动子（P）和一个操纵基因（O），在启动子上游还有一个分解（代谢）物基因激活蛋白（CAP）结合位点，以及一个调节基因（I）又称R基因，调节基因编码阻遏蛋白。操纵子(operon)的结构与功能InhibitorgenePS1S2S3启动子结构基因1，2，3...O操纵基因PromoterOperatorgeneStructuregene调控区结构基因操纵子表达阻遏蛋白结合RNA聚合酶结合阻遏蛋白表达功能蛋白?I阻遏物基因2阻遏蛋白的负性调节mRNA阻遏蛋白IDNAZYAOPpol没有乳糖存在时阻遏基因在没有乳糖存在时，乳糖操纵子处于阻遏状态。此时，Ⅰ基因列在P启动序列操纵下表达的乳糖阻遏蛋白与O序列结合，故阻断转录启动。阻遏蛋白的阻遏作用并非绝对，偶有阻遏蛋白与O序列解聚。因此，每个细胞中可能会有寥寥数分子β半乳糖苷酶、透酶生成。无乳糖时，1ac操纵子处于阻遏状态。i基因低水平表达产生蛋白R。R以四聚体的活性形式特异性地与操纵基因o结合，阻碍了RNA聚合酶与启动子P1ac的结合，阻止了基因的转录起动。mRNA阻遏蛋白有乳糖存在时IDNAZYAOPpol启动转录mRNA乳糖别乳糖β-半乳糖苷酶当有乳糖存在时，乳糖操纵子即可被诱导。真正的诱导剂并非乳糖本身。乳糖经透酶催化、转运进入细胞，再经原先存在于细胞中的少数β-半乳糖苷酶催化，转变为别乳糖。后者作为一种诱导剂分子结合阻遏蛋白，使蛋白构型变化，导致阻遏蛋白与O序列解离、发生转录，使β-半乳糖苷酶分子增加1000倍。有乳糖时，经原先存在于细胞中的少数β-半乳糖苷酶催化，转变为别乳糖。别乳糖与R结合使R构象变化，R四聚体解聚，失去与o的亲和力而与o解离。在体外试验中常用的诱导剂是异丙基硫代半乳糖苷（IPTG），在这个调节系统中，阻遏蛋白是主要的作用因子，而诱导物可以影响阻遏蛋白的活性；只有阻遏蛋白被诱导失活，结构基因才得以表达，这是一种负调控的方式。3CAP的正性调节分解代谢物基因激活蛋白CAP是同二聚体，在其分子内有DNA结合区及cAMP（环腺苷酸环鸟苷酸）结合位点。当没有葡萄糖及cAMP浓度较高时，cAMP与CAP结合，这时CAP结合在乳糖启动序列附近的CAP位点，可刺激RNA转录活性，使之提高50倍；当培养基中有葡萄糖存在时，cAMP浓度降低，cAMP与CAP结合受阻，因此乳糖操纵子表达下降。乳糖操纵子调控方式的比较负调控正调控调节蛋白阻遏蛋白CAP变构物别乳糖，乳糖cAMP与变构物结合无活性有活性基因位点O基因CAP位点结合于基因位点基因关闭基因开放未结合于基因位点基因开放基因关闭不与变构物结合有活性无活性由此可见，对乳糖操纵子来说CAP是正性调节因素，乳糖阻遏蛋白是负性调节因素。两种调节机制根据存在的碳源性质及水平协调调节乳糖操纵子的表达。4对调节机制的解释大肠杆菌根据碳源性质选择代谢方式。倘若有葡萄糖存在时，细菌优先选择葡萄糖供应能量。葡萄糖通过降低cAMP浓度，阻碍cAMP与CAP结合而抑制乳糖操纵子转录，使细菌只能利用葡萄糖。在没有葡萄糖而只有乳糖的条件下，阻遏蛋白与O序列解聚，CAP结合cAMP后与乳糖操纵子的CAP位点，激活转录，使得细菌利用乳糖作为能量来源。乳糖操纵子要点：调控发生在转录水平；调节基因产物阻遏蛋白对操纵子产生负调控；cAMP-CA