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⽣物信息分析中的reads是什么
由于受⽬前测序⽔平的限制,基因组测序时需要先将基因组断成DNA⽚段,然后再建库测序。reads(读长)指的是测序仪单次测序所得
到的碱基序列,也就是⼀连串的ATCGGGTA之类的,它不是基因组中的组成。不同的测序仪器,reads长度不⼀样。对整个基因组进⾏测
序,就会产⽣成百上千万的reads。
测序得到的原始图像数据经basecalling转化为序列数据,我们称之为rawdata或rawreads,结果以fastq⽂件格式存储,fastq⽂件
为⽤户得到的最原始⽂件,⾥⾯存储reads的序列以及reads的测序质量。在fastq格式⽂件中每个read由四⾏描述:
@readID
TGGCGGAGGGATTTGAACCC
+
bbbbbbbbabbbbbbbbbbb
Single-end(SE)测序:1个fastq⽂件
Pair-end(PE)测序:2个fastq⽂件分别存放read1和read2的数据
每个序列共有4⾏,第1⾏和第3⾏是序列名称(有的fq⽂件为了节省存储空间会省略第三⾏“+”后⾯的序列名称);第2⾏是序列;第4⾏
是序列的测序质量,每个字符对应第2⾏每个碱基,第4⾏每个字符对应的ASCII值减去64,即为该碱基的测序质量值,⽐如h对应的
ASCII值为104,那么其对应的碱基质量值是40。
碱基质量值范围为0到40。下表为Solexa测序错误率与测序质量值简明对应关系,具体计算公式如下:
Q=-10log10P
Solexa测序错误率与测序质量值简明对应关系:
⾼通量测序时,在芯⽚上的每个反应,会读出⼀条序列,是⽐较短的,叫read,它们是原始数据;
有很多reads通过⽚段重叠,能够组装成⼀个更⼤的⽚段,称为contig;
多个contigs通过⽚段重叠,组成⼀个更长的scaffold;
⼀个contig被组成出来之后,鉴定发现它是编码蛋⽩质的基因,就叫singleton;
多个contigs组装成scaffold之后,鉴定发现它编码蛋⽩质的基因,叫unigene.
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