ISSR和SSR标记在大豆、油菜、西瓜种子真实性和纯度鉴定中的比较的开题报告.docxVIP

ISSR和SSR标记在大豆、油菜、西瓜种子真实性和纯度鉴定中的比较的开题报告

本文将比较ISSR和SSR标记在大豆、油菜和西瓜种子真实性和纯度鉴定中的优劣，以期为今后更好的种子鉴定提供参考。

一、研究目的

随着现代生物技术的不断发展，种子真实性和纯度鉴定技术也在不断进步。ISSR和SSR标记属于分子标记技术中的重要手段，具有高度特异性、高通量和快速鉴定的特点。为了比较ISSR和SSR标记在大豆、油菜和西瓜种子真实性和纯度鉴定中的优劣，本文拟开展相关研究。

二、研究方法

1.材料准备：选取大豆、油菜和西瓜种子各10份，分别进行真实性和纯度鉴定。对于真实性鉴定，采用PCR扩增ISSR和SSR标记，以此进行样品的DNA鉴定。对于纯度鉴定，通过检测杂种率，判断样品是否为纯种，并通过染色体数目和型式鉴定样品的染色体组成。

2.实验步骤：

（1）DNA提取：从每份样品中取100mg样品，加入700μLCTAB提取液中进行固体裂解。将裂解液在65℃下进行30min的水浴，后添加500μL氯仿混匀，离心3min。将上清液转移到新离心管中，冷沉淀1h，离心15min，去除上清液。加入700μL75%酒精进行洗涤，离心10min，重复3次。最后加入TE缓冲液进行溶解，制备DNA样品。

（2）PCR反应：按照ISSR和SSR标记的扩增条件进行PCR反应，反应结束后进行胶染和电泳分析。

（3）染色体鉴定：采用江苏农业科学院的染色体观测方法，对样品的染色体进行计数和型式鉴定。

三、研究预期结果

通过比较ISSR和SSR标记在大豆、油菜和西瓜种子真实性和纯度鉴定中的优劣，本文预期得出以下结论：

1.ISSR标记在大豆、油菜和西瓜种子真实性和纯度鉴定中具有较高的准确性和稳定性。

2.SSR标记在大豆、油菜和西瓜种子真实性和纯度鉴定中具有较高的灵敏度和特异性。

3.种子真实性和纯度鉴定需要综合考虑多个分子标记技术，以提高鉴定的精度和可靠性。

四、结论

ISSR和SSR标记均适用于大豆、油菜和西瓜种子真实性和纯度鉴定，并且可以相互协作，提高鉴定的精度和可靠性。在今后的研究中，应进一步探索其他分子标记技术在种子鉴定中的应用。