BSA蛋白浓度测定.doc

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(完整word)BSA蛋白浓度测定

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(完整word)BSA蛋白浓度测定

蛋白含量测定(终点法):

普通酶标仪:波长:595nm,T:25

用0.01MPH7。4PBS将牛血清白蛋白(BSA)配成2mg/ml:称取0.01gBSA于2ml离心管中,加入5ml0.01MPH7。4PBS,振荡混匀.

标准曲线:

2mg/mlBSA(ul)

0

5

10

20

40

60

80

100

PBS(ul)

200

195

190

180

160

140

120

100

浓度

0

0。05

0。1

0.2

0.4

0.6

0.8

1

稀释protein:

稀释倍数

2

4

6

8

Protein

20ul

20ul

20ul

20ul

PBS

20ul

60ul

60ul

60ul

96孔酶标板中加入:

10ul各个浓度的BSA+270ul考马斯亮蓝G250

10ulprotein+270ul考马斯亮蓝G250

|25℃

开始反应

用八通道移液枪加入考马斯亮蓝G250,为避免太多气泡排枪不打到底,若有气泡用牙签将气泡排出。

最后关闭酶标仪并将用过的器皿洗涤干净.

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