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(完整word)BSA蛋白浓度测定
(完整word)BSA蛋白浓度测定
(完整word)BSA蛋白浓度测定
蛋白含量测定(终点法):
普通酶标仪:波长:595nm,T:25
用0.01MPH7。4PBS将牛血清白蛋白(BSA)配成2mg/ml:称取0.01gBSA于2ml离心管中,加入5ml0.01MPH7。4PBS,振荡混匀.
标准曲线:
2mg/mlBSA(ul)
0
5
10
20
40
60
80
100
PBS(ul)
200
195
190
180
160
140
120
100
浓度
0
0。05
0。1
0.2
0.4
0.6
0.8
1
稀释protein:
稀释倍数
2
4
6
8
Protein
20ul
20ul
20ul
20ul
PBS
20ul
60ul
60ul
60ul
96孔酶标板中加入:
10ul各个浓度的BSA+270ul考马斯亮蓝G250
10ulprotein+270ul考马斯亮蓝G250
|25℃
开始反应
用八通道移液枪加入考马斯亮蓝G250,为避免太多气泡排枪不打到底,若有气泡用牙签将气泡排出。
最后关闭酶标仪并将用过的器皿洗涤干净.
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