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国家自然科学基金完整的标书范文

20**年国家自然科学基金面上项目

题目：研究真核起始因子X-Y轴调控糖基转移酶对肠癌

肝转移的作用机制

摘要：

大肠癌手术后复发转移中，肝、肺转移是最常见的转移模

式，但其机制一直未能阐明。在前期研究中，我们建立了大肠

癌远处转移的特征分子谱式，发现真核起始因子Z家族的成

员X和Y在肝转移中具有关键调节作用。X-Y轴能够介导大

肠癌肝转移的发生，X可促进细胞获得运动能力，并在转移灶

中通过Y的相互作用促进细胞异常增殖。进一步实验表明，X

能调节下游糖基转移酶，可能激活肠癌细胞膜表面半乳糖残基，

从而通过与肝细胞膜上特异性受体相互作用而使肠癌细胞“定

居”于肝脏。可见，X-Y调节轴对于大肠癌肝转移至关重要。

本项目拟在此基础上，从大样本回顾性分析中总结X-Y对于

结肠癌肝转移的临床相关性和预后判断价值。同时，在细胞和

动物模型中进一步深入探讨其在结肠癌肝转移调控中的作用方

式和调控分子机制，解析下游效应途径及靶点。

一）立项依据与研究内容（4000-8000字）：

一、立项依据

大肠癌是一种发生在结肠或直肠中的癌症，是最常见的恶

性肿瘤之一，全球每年新发病人约八百万，占所有恶性肿瘤的

10%-15%，其发病率和死亡率居恶性肿瘤的第三位。随着手术、

化疗、放疗水平的提高，大肠癌患者的生存率有了较大的提高，

但远处转移是影响其预后的最主要因素。在美国大肠癌中有

90%的死亡由肿瘤的远处转移所致。因此，通过研究大肠癌转

移机制，正确认识大肠癌术后转移模式，制定合理的术后随访

方案，采取有针对性的干预措施，提高生存率至关重要。

我们的研究关注于肝转移中的特异分子标志，其中两个成

员属于真核起始因子Z家族：X和Y。Z真核起始因子在真核

生物翻译起始过程中起着重要作用，但其在肿瘤中的作用尚不

清楚。我们发现Y基因在大肠癌细胞中高表达，其表达被干

扰后，细胞增殖能力显著抑制，细胞凋亡比例提高。考虑到X

与Y之间存在相互结合，我们进一步观察了两者之间的交互

作用。有意思的是，X对于Y的促恶性增殖功能是必需的，

表现在沉默X表达之后，过表达Y对大肠癌细胞的增殖调控

失活。我们提出科学假设：真核起始因子X-Y轴能够调控大

肠癌肝转移的发生，X可介导细胞获得运动能力，并且在转移

灶中调节Y发挥促进肿瘤细胞继发性增殖的作用，具体作用

机制有待阐明。

在哺乳动物中，Z因子的亚基有8种，按分子量从大到小

排列而命名。Z因子参与真核细胞翻译过程，而调节蛋白合成

在维持细胞生长控制中起重要作用。Z因子不仅能通过促进

mRNA与40s亚基结合，而且还可以独自与游离的40s亚基结

合，影响40s亚基与60s亚基及其他亚基蛋白的结合或解离。

Z家族成员一般含有PCI和MPN结构域，这两类结构域都参

与蛋白-蛋白相互作用，部分还具有RNA识别结构域，可能参

与RNA的结合。除此之外，Z因子还被发现具有调控细胞周

期的作用。通过调节不同类型的mRNA的翻译起始，Z因子

就可以选择性地调控蛋白的合成，从而对肿瘤细胞的生长的转

移等生物学行为进行调控。

Z家族中部分成员已证实在肿瘤的发生、发展中扮演重要

角色，已报道的包括：A、B、C、D等。Y的致癌作用由申请

人首先报道，随后其在胶质瘤和呼吸系统肿瘤中的作用也被其

他研究者发现。而关于X与恶性肿瘤的关系目前还未见文献

报道，可见在针对X、Y两个分子尤其是交互作用方面，申请

人尚居于领先的研究地位。

早期的研究表明，X在包含Y蛋白的复合物与40S核糖

体亚基结合的过程中扮演着关键的链接作用。缺失X时，两

者的结合不稳定，并会降低翻译起始系统的调节能力。最近的

研究表明，W可以与X竞争性地结合Y，形成不同的Z复合

物。这些Z复合物可以招募tRNA或mRNA，从而调节下游

基因表达，进而影响肿瘤细胞的生长、迁移等生物学过程。

在最近的研究中，我们进一步深入探讨了X的调控机制。

我们发现，在敲减X后，肠癌细胞中多个关键调控节点发生

了改变，其中包括3个半乳糖基转移酶（β1,3-GalT;β1,4-GalT-

1;β1,4-GalT-7）的表达降低。糖