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使用兔外周血B细胞制备特异性识别BSA的重组单兔克隆抗体
摘要
20世纪80年代发明的杂交瘤技术将来自小鼠的B淋巴细胞和小鼠的骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞,成功克服了B淋巴细胞无法在体外长期培养的问题。但这一方法并不适用于兔源抗体的开发,一方面由于兔子特殊的免疫机制使得获得稳定生长的兔骨髓瘤细胞极其困难;另一方面由于兔子特殊的抗体产生机制中很多关键步骤仍未被研究清楚。这些原因导致兔子B淋巴细胞的筛选模糊不清,进而使得NGS测序文库的数据冗余不可避免。本文介绍一种通过使用流式细胞分选技术从外周血中分离具有特异性抗原结合活性的记忆B淋巴细胞的方法,无需骨髓瘤细胞的融合筛选,也避免了T淋巴细胞等对基
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