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影响血常规检验标准化操作的因素
血常规检验不仅是诊断各种血液病的主要依据,而且对其他系
统疾病的诊断和鉴别也可提供重要的信息,是临床医学检验中最常
用、最重要的基本内容之一,因此,血常规检测准确与否致关重要。
本文的目的是从标本采集,抗凝,血球仪分析,血涂片制备染色,
复片五方面来阐述血常规标准化检验在检测中受影响的因素,以提
高检验质量的准确性和可靠性。检验者在实验室检验中,要充分考
虑影响血常规检验的各种因素,严格质量控制、标准化操作、减低
误诊、漏诊,提高诊断
标本采集操作的标准化
在自动化仪器普遍应用的现代实验室,血液标本的正确采集和
处理是获得可靠检验结果的关键,也是分析前质量控制的主要内
容。血常规标本的采集,可分为毛细血管采血法和静脉采血法,一
般要求用静脉采血法,因为静脉采血不易受取血部位的皮肤、环境
温度的影响。而毛细血管标本,受末梢血循环状态、采血技术的影
响,有时血液易形成小凝块,堵塞机器造成实验结果偏差1。对于
少数取静脉血有困难的患者,如婴幼儿、大面积烧伤的患者或需频
繁采血进行检查的病例,可采用毛细血管采血法,且采集末梢血更
易被患者接受,一些基层医疗单位末梢采血也是很普遍和实用。就
wbc、rbc检测静脉血与末梢血,两者结果差异无显著性2。为了避
免瘀血和浓缩,压脉带压迫时间不可过长,一般应2分钟,大静脉
血流受阻使毛细血管内压力增高,血管内血液与组织液交换,能使
相对分子量5000的物质逸入组织液,同时,随着压迫时间延长,
局部组织发生缺氧而引起血液成分变化较大,检查结果出现不应有
的增高或降低,当需要重复采血时,建议采用另一只手臂。因为毛
细血管标本,受末梢血循环状态、采血技术的影响,有时血液易形
成小凝块,堵塞机器造成实验结果偏差。血细胞分析仪使用标本推
荐用静脉抗凝血,真空采血系统的应用最符合标准化操作要求。
标本抗凝操作的标准化
用于血常规检验的血样必须经抗凝剂抗凝处理,在众多抗凝剂
中,已二胺四乙酸盐(edta)均可与钙离子结全成螯合物,从而阻
止血液凝固。edta对红、白细胞形态影响很小,根据国际血液学标
准公委员会(icsh)1993年文件建议,血细胞计数用edta二钾作
抗凝剂,用量为edta-k22h2o,1.5~2.2mg(4.45±0.85μmol)
/ml血液。edta-na2与edta-k2对血细胞计数影响均较小,但二钠
溶解度明显低于二钾,有时影响抗凝效果,其他抗凝剂不适合于血
细胞计数3。除采血因素的影响,多数情况下,采血量取决于血液
和抗凝剂的比例,血液比例过高时抗凝剂相对不足,血浆中出现微
凝血块的可能性增加。在用于血细胞分析仪时,微凝血块可能阻塞
仪器,同时影响一些检验指标;血液比例过低,抗凝剂相对过剩,
对检验指标会造成严重影响。血液经edta抗凝后,白细胞的形态
会发生改变,这种改变和时间及edta浓度有关。如果血样少,edta
的浓度达到2.5mg/ml,中性粒细胞肿胀、分叶消失,血小板肿胀、
崩解、产生血小板大小的碎片,这些改变都会使血常规检验细胞计
数得出正确结果。必须严格执行卫生行业标准文件“真空采血管及
添加剂”
血细胞分析仪计数的标准化
懂得如何进行室内和室间质控,正确判断和分析失控原因,定
期进行仪器的清洁、保养和维护。血液标本采集后在室温,必须4
小时内检测,手动上机前一定要将血液标本颠倒混匀≥8次。如需
制备血涂片,应在采血后3小时内涂制。血液分析仪,只能当作一
种过筛手段,至今血液分析仪尚不能完全替代人工显微镜对各类血
细胞的识别和分类镜检,因为仪器还不能准确区分幼稚细胞、异常
淋巴细胞和有核红细胞等。因此,当出现白细胞、红细胞及血小板
明显升高或降低,白细胞分血球仪操作的标准化,是分析中质量控
制的主要内容,必须熟悉检验理论和操作的标准类出现异常结果,
白细胞、红细胞及血小板直方图或散点图出现异常,为了保证血液
分析仪检测结果的真实性和提供临床诊断价值,还须进一步用显微
镜涂片复检进行验证,各实验室必须制定适合本实验室的复检规
则。
血涂片制备的标准化
血涂片既可由非抗凝的静脉血和毛细血管血制备,也可由
deta-k2抗凝血制备,edta-k2抗凝血中,钙离子被螯合后,能阻
止血小板聚集,推片时血小板均匀平均,显微镜下易于对血小板进
行观察评价,但有时可观察到因edta-k2引起的红细胞皱缩、白细
胞丛集、诱发血小板假性聚集现象,推荐使用非抗凝血制备血涂片,
这样可减少因抗凝剂所致的人工假
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