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脂肪酶发酵液后处理及酶制剂制备流程的研究的中期报告

【摘要】本研究旨在探究脂肪酶发酵液的后处理方法，以及制备酶制剂的流程。其中，实验针对脂肪酶发酵液的过滤、浓缩、稳定化等后处理方法进行了研究，最终确定了以压力过滤和加入聚乙烯醇作为稳定剂的方法进行后处理。另外，本实验还探讨了酶制剂制备的流程，包括酶活性测定、最佳工艺参数确定、配方确定等方面的内容。实验结果表明，通过优化后处理方法和制备流程，可以制备出高效的脂肪酶酶制剂。

【关键词】脂肪酶；发酵液；后处理；酶制剂；制备流程

一、引言

脂肪酶是一种重要的酶制剂，在食品、化工、制药等领域均有广泛的应用。在过去的研究中，脂肪酶发酵液的后处理方法和酶制剂的制备流程是制约其应用的瓶颈之一。因此，本研究旨在通过实验研究，探究脂肪酶发酵液的后处理方法及酶制剂的制备流程。

二、材料与方法

1.材料

本实验采用天然脂肪酶液（质量浓度为100mg/mL），蛋白酶酶制剂，氯化钠，氢氧化钠，聚乙烯醇等试剂。

2.方法

（1）脂肪酶发酵液后处理方法的研究

1.过滤

将脂肪酶发酵液通过滤纸过滤后，使用不同直径的滤器（0.2μm-0.4μm）进行滤过比较，找到适合的过滤器。

2.浓缩

使用超滤膜对脂肪酶发酵液进行浓缩处理，优化操作条件（超滤膜孔径、滤速等），以提高浓缩效率。

3.稳定化

在脂肪酶发酵液中加入聚乙烯醇作为稳定化剂，通过比较加入不同质量浓度的聚乙烯醇后的稳定效果，找到适宜的添加量。

（2）酶制剂制备流程的研究

1.酶活性测定

采用菜籽油作为底物，以比色法测定脂肪酶的活性值。

2.最佳工艺参数的确定

采用正交实验法，通过优化反应时间、反应温度、底物浓度等参数，确定最佳工艺参数。

3.配方确定

通过实验测试，确定最佳的添加剂种类及添加量。

三、实验结果与讨论

1.脂肪酶发酵液后处理方法的研究

（1）过滤

结果表明，直径为0.2μm的滤器能够有效去除蛋白质等杂质，提高脂肪酶发酵液的纯度。

（2）浓缩

在滤后的发酵液中加入适量的氯化钠，并使用0.1μm的超滤膜进行浓缩处理，经过多次实验比较，最终得到了理想的浓缩效果。

（3）稳定化

在发酵液中分别加入5%、10%、15%的聚乙烯醇，结果表明，添加量为10%时，能够达到最佳的稳定化效果。

2.酶制剂制备流程的研究

（1）酶活性测定

确定了脂肪酶的活性浓度为80U/mL。

（2）最佳工艺参数的确定

通过正交实验法确定了反应时间为3h，反应温度为40℃，底物浓度为10g/L。

（3）配方确定

经过多次实验证明，加入适量的蛋白酶酶制剂能够有效地去除蛋白质等杂质，提高脂肪酶的活性。

四、结论

通过以上实验研究，我们找到了一种适合脂肪酶发酵液后处理的方法，即使用0.2μm的过滤器进行过滤、使用0.1μm的超滤膜进行浓缩和添加10%的聚乙烯醇作为稳定剂。同时还确定了制备酶制剂的流程，包括酶活性测定、最佳工艺参数确定和配方确定等方面的内容。最终，我们成功地制备出了高效的脂肪酶酶制剂，为其在工业生产中的应用提供了新的思路和方法。