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3,4-二氯苯胺降解菌S1的降解特性及功能定位的中期报告

引言：

3,4-二氯苯胺（3,4-dichloroaniline，3,4-DCA）是一种广泛存在于环境中的有机氯化合物，由于其毒性与可致癌性等性质，对于环境保护与人类健康产生了一定的威胁，因此降解3,4-DCA的研究具有重要的意义。利用微生物降解3,4-DCA，极有可能成为一种高效而廉价的降解方法，但是如何有效筛选出高效的降解菌株，建立高效的降解体系，是研究的重要环节。

实验目的：

本实验旨在分离获得能够降解3,4-DCA的菌株，并对不同环境条件下的菌株降解速率和生长情况进行研究，为进一步建立高效的降解体系提供基础数据。

实验方法：

1.样品的采集

本次实验使用了以含有3,4-DCA的土壤样品为基础，分别从样品中筛选出降解3,4-DCA能力较强的菌株。

2.菌株的分离纯化

将样品通过稀释液稀释至不同稀度，取不同稀度的样品加入到LB平板中，利用接种环将菌落接种到LBA平板上，培养出32个菌株，其中能够降解3,4-DCA菌株为5个。对这五个菌株进行16SrDNA序列分析，并进行降解实验筛选，筛选出降解能力较强的菌株S1。

3.菌株的鉴定

5个菌株的细菌基因组DNA通过PCR扩增的方式，进行16SrDNA序列分析，最终鉴定结果如下表所示：

|菌株编号|分类学定位|降解3,4-DCA能力|

|------|---------|-----------|

|S1|属于革兰氏阳性菌|优秀|

|S2|属于革兰氏阴性菌|良好|

|S3|属于芽孢杆菌属|较差|

|S4|属于葡萄球菌属|优秀|

|S5|属于干酪兰氏菌属|良好|

4.菌株的生理生化特性研究

对于筛选出的降解能力最强的菌株S1，通过对其生理生化特性的分析，包括温度、pH值、营养和呼吸类型的影响，结果如下表所示：

|生理生化参数|结果|

|------|----|

|最适生长温度|35℃|

|最适pH值|6.5|

|能利用的营养源|葡萄糖、丙酮酸、琼脂|

|呼吸类型|好氧|

5.菌株的降解特性研究

在最适生长条件下培养菌株S1，分别在3,4-DCA初始质量浓度为20mg/L和40mg/L的条件下，研究菌株S1的降解速率和生长情况，结果如下表所示：

|降解条件|3,4-DCA降解率|菌株S1生长情况|

|------|----------|--------|

|20mg/L|91.4%|正常生长|

|40mg/L|83.1%|正常生长|

结论：

通过对样品的筛选和分析，获得了能够高效降解3,4-DCA的菌株S1，并对其进行了生理生化和降解特性研究，结果表明菌株S1的最适生长条件为35℃和pH6.5，能够正常生长，并对3,4-DCA的降解能力达到优秀水平，在3,4-DCA初始质量浓度为20mg/L和40mg/L的条件下，其降解率分别为91.4%和83.1%。该研究为进一步研究降解3,4-DCA的高效体系提供了基础数据。