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鼠伤寒沙门氏菌的cya基因缺失及自杀质粒pKNG101的改造的任务书
任务书
题目：鼠伤寒沙门氏菌的cya基因缺失及自杀质粒pKNG101的改造
任务目标：
1.通过基因编辑技术或其他方法，将鼠伤寒沙门氏菌中的cya基因进行缺失或突变；
2.对缺失或突变株进行生化与分子生物学鉴定，确认基因编辑或其他方法的效果；
3.对pKNG101自杀质粒进行改造，使其适用于鼠伤寒沙门氏菌；
4.验证改造后的pKNG101自杀质粒在鼠伤寒沙门氏菌中的应用效果。
研究内容：
1.利用反向遗传学方法对鼠伤寒沙门氏菌进行突变或基因编辑；
2.利用PCR、Westernblot等技术鉴定鼠伤寒沙门氏菌中cya基因的缺失或突变情况；
3.利用细菌培养、基因克隆、遗传转化等技术改造pKNG101自杀质粒；
4.采用遗传学实验验证改造后的pKNG101自杀质粒在鼠伤寒沙门氏菌中的应用效果。
研究方法：
1.实现基因编辑的方法可以采用CRISPR/Cas9等技术；
2.PCR、Westernblot等技术可以用于鉴定cya基因的缺失或突变情况；
3.利用细菌培养、基因克隆、遗传转化等技术改造pKNG101自杀质粒；
4.实验中涉及到的细菌包括鼠伤寒沙门氏菌和其它实验室惯用菌株。
研究意义：
1.探索鼠伤寒沙门氏菌cya基因的功能及其在细菌代谢、致病性等方面的作用；
2.提高基因编辑技术和pKNG101自杀质粒改造技术的应用水平及效果；
3.为鼠伤寒沙门氏菌病的防治提供科学依据。
预期成果：
1.突变或缺失cya基因的鼠伤寒沙门氏菌株；
2.改造成功的pKNG101自杀质粒；
3.验证改造后的pKNG101自杀质粒在鼠伤寒沙门氏菌中的应用效果；
4.一篇科学论文。
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