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【全文翻译】中科院病毒所发表于《细胞研究》上的文章
【译者按】中科院病毒所这些日子来一直是大家追踪的热点。大
家带着放大镜对其进行了许多观察,这也难怪,因为一场与病毒有关
的浩劫正在中华大地肆掠。昨天,病毒所官方网站公布了他们最近的
最新研究成果,引来了不少争议,也有许多人在进行病毒和专利申请
方面的各种科普——这两个方面我都不在行。好在其文章我能找到,
也能读懂一些,我理解其专利也是与文章内容密切相关的(如果不是,
请指出),于是我今天就认真拜读了一下,顺便全文翻译成汉语。争
论的双方,如果在不明确争论内容的时候,也许是没有意义的争吵。
所以,我顺便将这个内容分享给大家,希望对各位有用。如果可能,
我以后抽空再对这篇文章进行一些解读。
【说明】原文是一个快报,其版权归原作者所有,本人对只是对
文章进行了全文翻译。由于专业差异,本人无法保证对原文进行了最
合适的翻译。要看原文,可在原文链接中找到。如果翻译有不妥之处,
请善意指出,我并无恶意。谢谢您的配合!
瑞德西韦和氯喹在体外细胞实验中能有效抑制新近出现的新型冠
状病毒(2019-nCoV)
亲爱的编辑,
2019年12月,在中国中部1100万人口的武汉市,出现了一种
先前未知病原体引发的新型肺炎。最初的病例与暴露于武汉某海鲜市
场有关,截至到2020年1月27日,中国官方报告了中国大陆2835
例确诊病例,其中81例死亡。此外,在中国香港、澳门和台湾地区发
现了19例确诊病例,在泰国、日本、韩国、美国、越南、新加坡、尼
泊尔、法国、澳大利亚和加拿大发现了39例输入病例。该病原体被鉴
定为一种新型冠状病毒(2019-nCoV),这与严重急性呼吸综合征冠
状病毒(SARS-CoV)有很大的相关性。目前还没有针对这种新病毒
的特殊治疗方法,因此迫切需要寻找到有效的抗病毒药物来对抗这种
疾病。
有效的药物发现方法,是测试现有抗病毒药物是否能有效治疗相
关病毒感染。2019-nCoV属于β冠状病毒,也含有SARS-CoV和中
东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)。有一些药物,如利巴韦林、
干扰素、利托那韦、皮质类固醇,尽管其疗效仍然存在争议,但已经
在SARS或MERS患者中进行了治疗。在本研究中,我们评估了5种
美国食品药品监督管理局(FDA)批准的药物,包括利巴韦林、喷昔洛韦、
硝唑嗪、纳法莫司、氯喹,以及两种广谱抗病毒药物雷米西韦(GS-
5734)和法维匹拉韦(T-705)对2019-nCoV的体外抗病毒效果。
这些化合物对2019-nCoVs的细胞毒性、病毒产量和感染率方面
的影响进行了标准测定。首先,用CCK8法测定候选化合物在VeroE6
细胞(ATCC-1586-)中的细胞毒性。然后,用nCoV-
2019BetaCoV/Wuhan/WIV04/2019感染VeroE6细胞,感染复数
(MOI)为0.05,在不同浓度的测试药物下进行实验。对照组采用二
甲基亚砜(DMSO)。通过定量实时RT-PCR(qRT-PCR)对细胞上
清液中的病毒复制数量进行定量测定,并在感染后48小时(p.i.)通
过免疫荧光显微镜观察病毒核蛋白(NP)的表达来确定疗效(此时感
染时间点的细胞病变效应不明显)。要减少病毒感染,七种测试药物
中,有三种核苷类似物:利巴韦林(半数最大有效浓度(EC50)=
109.50μμm,半细胞毒性浓度(cc50)>400μm,选择性指数(SI)
>3.65),喷昔洛韦(EC50 = 95.96 μM,CC50 400 μM,SI 4.17)
和favipiravir(EC50 = 61.88 μM,CC50 400 μM,SI 6.46)是必
需的(图1a和补充信息图S1)。然而,尽管favipiravir在VeroE6
细胞中的EC50值高达67μM,但它在保护小鼠免受埃博拉病毒攻击方
面已被证明是100%有效的,因此建议进一步的体内研究来评估这种
抗病毒核苷。Nafamostat是一种有效的MERS-CoV抑制剂,可防止
细胞膜融合,对2019-nCoV感染具有抑制作用(EC50 = 22.50 μM,
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