《植物次生代谢产物有机酸的测定》.pdf

GB/TXXXXX—XXXX

植物次生代谢产物有机酸的测定

1范围

本标准规定了植物次生代谢产物有机酸的液相色谱-质谱/质谱测定方法。

本标准适用于蔬菜、水果、中药材、茶叶、烟草等样品中酒石酸、奎宁酸、苹果酸、莽草酸、乳酸、

柠檬酸、富马酸、琥珀酸、乌头酸、α-酮戊二酸、己二酸、没食子酸、香草酸、绿原酸、咖啡酸、丁香

酸、对香豆酸酸、阿魏酸、对羟基苯甲酸、肉桂酸、2,5-二羟基苯甲酸和3,4-二羟基苯甲酸的测定。

2规范性引用文件

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GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3原理

试样用50%甲醇水溶液加热回流提取后，经反相色谱柱分离，液相色谱-质谱/质谱法测定和确证，

内标法定量。

4试剂或材料

除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

4.1甲醇：色谱纯。

4.2甲酸：色谱纯。

4.30.1%甲酸水溶液：准确移取甲酸1.0mL于1L容量瓶中，用水定容至刻度。

4.450%甲醇水溶液：准确移取甲醇500.0mL于1L容量瓶中，用水定容至刻度。

4.5有机酸标准品：没食子酸、香草酸、绿原酸、咖啡酸、丁香酸、对香豆酸、阿魏酸、酒石酸、奎

宁酸、苹果酸、莽草酸、乳酸、柠檬酸、富马酸、琥珀酸、乌头酸、己二酸、α-酮戊二酸、对羟基苯

甲酸、肉桂酸、2,5-二羟基苯甲酸、3,4-二羟基苯甲酸和琥珀酸-2,2,3,3-d4，纯度均≥98%。

4.6混合标准储备液A（酒石酸、奎宁酸、苹果酸、莽草酸、乳酸、柠檬酸、富马酸、琥珀酸、乌头

酸、α-酮戊二酸、没食子酸混合标准储备溶液）：分别准确称取各有机酸标准品50.00mg于10mL容

量瓶中，用水溶解并定容至刻度，混匀，配制成5000.0mg/L的有机酸单一标准储备液，分别吸取适量

各有机酸单一标准储备液于10mL容量瓶中，用水稀释并定容至刻度，混匀，配制成100mg/L的混合

标准储备液A，于0℃～4℃保存，有效期为3个月。

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4.7混合标准储备液B（己二酸、香草酸、绿原酸、咖啡酸、丁香酸、对香豆酸酸、阿魏酸、对羟基

苯甲酸、肉桂酸、2,5-二羟基苯甲酸、3,4-二羟基苯甲酸混合标准储备溶液）：分别准确称取各有机酸

标准品50.00mg于10mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，混匀，配制成5000mg/L的有机酸单

一标准储备液，分别吸取适量各有机酸单一标准储备液于10mL容量瓶中，用甲醇稀释并定容至刻度，

混匀，配制成100mg/L的混合标准储备液B，于0℃～4℃保存，有效期为3个月。

4.8内标储备液：准确称取琥珀酸-2,2,3,3-d410.00mg于100mL容量瓶中，用50%甲醇水溶液溶解并

定容至刻度，混匀，配制成浓度为100mg/L的内标储备液。

4.9内标稀释液Ⅰ：准确吸取内标储备液2.5mL于1L容量瓶中，用50%甲醇水溶液稀释并定容至刻

度，混匀，即得浓度为250µg/L内标稀释液Ⅰ溶液。

4.10内标稀释液Ⅱ：准确吸取内标储备液1.0mL于100mL容量瓶中，加50%甲醇水溶液稀释并定

容至刻度，混匀，即得浓度为1mg/L内标稀释液Ⅱ溶液。

4.11混合系列标准工作溶液：分别准确移取不同体积混合标准储备液A和混合标准储备溶液B于10

mL容量瓶中，再准确加入2.5mL内标稀释液Ⅱ，用50%甲醇水溶液稀释配制成不同浓度的系列标准

工作溶液，现配现用。

4.120.22μm微孔尼龙滤膜。

5仪器设备

5.1液相色谱-质谱/质谱联用仪：配有电喷雾离子源（ESI）。

5.2电子天平:感量为0.0001g和0.01mg。

5.3高速离心机：转速不低于9