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小麦条锈菌角质酶基因的克隆、表达及功能分析的任务书

任务书

题目：小麦条锈菌角质酶基因的克隆、表达及功能分析

任务目标：

1.克隆小麦条锈菌角质酶基因；

2.构建表达载体，并进行表达；

3.对表达产物进行纯化和鉴定；

4.进行功能分析，探究该基因在小麦条锈菌感染过程中的作用。

任务内容：

1.采集小麦条锈菌样品，提取总RNA并进行RT-PCR，克隆得到角质酶基因；

2.构建表达载体，将基因克隆入载体中并经过酵母菌表达检验，最终构建可表达该基因的原核表达载体；

3.利用原核表达体对该基因进行大量表达，并对表达产物进行纯化和鉴定；

4.利用建立的表达体系研究该基因对小麦条锈菌的感染过程中的作用机制，包括生长速率、形态、病原活性等方面的变化，以及对宿主细胞接触和侵袭等方面的影响。

任务要求：

1.病原样品的采集和处理应符合实验室安全规定；

2.实验过程中应进行正确的质量控制，确保实验结果的可信度和准确性；

3.实验后应对结果进行统计和分析，并撰写实验报告。

参考文献：

1.Zhao,J.,Liu,B.,Zhang,J.,Dong,X.,Cheng,Q.(2018).Aroleforcutinase-likeproteinCUT6inthefungalplantpathogenFusariumgraminearum.Frontiersinmicrobiology,9,2521.

2.Xu,X.,Chen,S.,Yin,C.,Zhang,Y.(2014).Thecutinase-likegeneCDELisnecessaryforappressorialpenetrationofColletotrichumorbiculareintohostplantleaves.Molecularplantpathology,15(4),335-345.

3.Li,Y.,Wang,Y.,Liu,X.(2017).SequenceanalysisofthecutinaseBgenefromCladosporiumfulvumanditseffectonplantdefense.Journalofagriculturalandfoodchemistry,65(23),4734-4739.