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幽门螺杆菌重组HpaA蛋白的表达及其包涵体纯化方法的探讨的任务书
一、背景
幽门螺杆菌(Helicobacterpylori)是一种人类胃肠道病原菌，可以引起各种胃病和消化系统肿瘤，是近年来越来越受到人们关注的问题之一。其中，幽门螺杆菌的表面蛋白HpaA与其定植、致病等生物学特性相关联，因此对HpaA蛋白进行研究有助于深入了解幽门螺杆菌的致病机制。
二、任务
1.熟悉幽门螺杆菌的生物学特性及HpaA蛋白的结构、功能和研究进展情况；
2.掌握常规细菌发酵技术和表达载体构建技术，设计构建目的基因中的HpaA蛋白表达载体，包括起始子、保守序列和标签等设计；
3.采用大肠杆菌等细菌进行HpaA蛋白表达和纯化，探究细胞的诱导条件和优化方案；
4.通过SDS、Westernblotting和质谱分析等方法鉴定表达纯化的HpaA蛋白样品的纯度和活性；
5.探究包涵体纯化方法，包括溶剂、洗涤、重悬等步骤以及影响组装的因素；
6.最终得到HpaA蛋白的高效表达、纯化和包涵体组装方法，并进行初步功能研究。
三、要求
1.参考国内外相关文献，掌握HpaA蛋白表达纯化及包涵体组装技术的前沿发展情况；
2.清晰明了的表达载体构建和纯化方法，具备一定的技术可行性和科学性；
3.实验细致入微、结果准确可靠，确保HpaA蛋白样品的高纯度和活性；
4.思路周密、论述清晰、组织严谨，能够准确反映HpaA蛋白表达、纯化和包涵体组装的主要实验过程和结果。
四、参考文献
1.LuY,RedlingerT,AvolioJ,etal.SurfaceexpressionandlimitedsecretionoffunctionalrecombinantHelicobacterpyloriHpaAinEscherichiacoli[J].Proteinexpressionandpurification,2005,40(2):259-267.
2.ShimizuT,KidaY,KuwanoK.SuppressionofHelicobacterpylori‐inducedinterleukin‐8productioninvivobybaculovirus‐mediatedRNAinterference[J].Cancerscience,2007,98(10):1593-1597.
3.JangKH,JangHS,PackSP,etal.ProductionofrecombinantHelicobacterpyloriHpaAtruncatedproteinwithfunctionalDNAbindingdomaininEscherichiacoli[J].Proteinexpressionandpurification,2008,57(1):156-162.
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