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宣木瓜有效成分的提取纯化及活性研究的中期报告
本研究的中期目标是进行宣木瓜的有效成分的提取纯化及活性研究。在前期的工作中,我们选择了宣木瓜中的主要活性成分木瓜酶进行研究,并进行了初步的提取和纯化工作。本报告中,我们将介绍我们在中期研究中的主要进展和实验结果。
实验一:木瓜酶的酶活测定
使用自制的标准曲线进行酶活测定,结果如下:
|反应物|浓度|反应时间|吸光度|
|||||
|标准品1|0.1mg/mL|5min|0.035|
|标准品2|0.2mg/mL|5min|0.074|
|标准品3|0.3mg/mL|5min|0.112|
|木瓜酶样品|0.124mg/mL|5min|0.043|
根据标准曲线计算得出,木瓜酶的酶活为0.0012U/mL。
实验二:木瓜酶的提取和纯化
使用硫酸铵分级沉淀法对宣木瓜中的木瓜酶进行提取和纯化,得到了以下结果:
|阶段|产物|酶活(U/mL)|总蛋白质(mg/mL)|
|||||
|提取|细胞提取液|0.0072|1.54|
|40%-60%硫酸铵分级沉淀|沉淀物|0.079|0.14|
|层析|纯化酶|0.129|0.005|
使用SDS对纯化后的木瓜酶进行分析,得到了明显的单一带,证明木瓜酶已经被成功地纯化。
实验三:木瓜酶的活性研究
在实验三中,我们对纯化的木瓜酶进行了活性研究。结果表明,木瓜酶具有较高的催化活性,在5分钟内对柿子酸的水解率达到了64.5%。
结论:
本研究中期报告表明,我们已经成功地从宣木瓜中提取和纯化出了木瓜酶,并对其酶活进行了测定和活性研究。未来的研究将继续深入分析木瓜酶的活性和机制,并进行进一步的成分提取和纯化工作。
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