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银杏黄酮相关基因的克隆及转化的任务书
任务要求:
1.克隆银杏黄酮合成和代谢相关基因。根据先前的研究,可以考虑靶向银杏黄酮合成途径中的苯丙酸途径,如PAL、C4H、4CL等基因,或针对银杏黄酮代谢途径中的UDP醛酸酰基转移酶基因进行克隆。
2.构建适当的表达载体,将目标基因克隆进去。可以使用常见的表达载体,如pCAMBIA等。
3.通过农杆菌介导的遗传转化等方法,将表达载体载入银杏组织中。可选用多种目标组织,如芽、叶、根等。
4.筛选和鉴定转化成功的植株。通常,可以使用PCR/RT-PCR,Southern/Westernblotting等方法,对转基因植株进行鉴定和分析。
5.对转化成功的植株进行功能分析。可以通过HPLC、GC-MS等方法,分析转基因植株中银杏黄酮及其相关代谢产物的含量和组成情况,评价基因功能是否得到改善及其对银杏黄酮合成和代谢的影响。
6.综合分析和评估研究结果。结合前期的研究成果和源自其他文献的数据,对目标基因的作用机制和功能进行综合分析和评估,为后续银杏黄酮代谢途径研究提供基础和启示。
参考文献:
1.GaoB,etal.Cloningandexpressionofcinnamate4-hydroxylasegenefromGinkgobiloba.BiotechnologyBulletin,2016,32(6):71-77.
2.MaY,etal.CloningandexpressionanalysisofUGTgenesinvolvedinflavonoidbiosynthesisinGinkgobiloba.JournalofPlantPhysiology,2020,249:153172.
3.ShenD,etal.OverexpressionofaUDP-glycosyltransferasegenefromGinkgobilobainArabidopsisthalianaenhancesflavonol3-O-glycosideproductionandabioticstresstolerance.Planta,2016,244(6):1293-1308.
4.LiJ,etal.Genome-wideidentificationandanalysisoftheUDP-glycosyltransferasegenefamilyinGinkgobiloba.Planta,2019,250(6):2039-2054.
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