SN_T 5487-2023 十足目虹彩病毒1感染检疫技术规范.docxVIP

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CCS?B?52

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准

SN/T?5487—2023

十足目虹彩病毒?1?感染检疫技术规范

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中华人民共和国海关总署 发?布

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前 言

本文件按照?GB/T1.—2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。

本文件起草单位:中华人民共和国深圳海关、深圳市检验检疫科学研究院、深圳质标科技有限公司、

深圳技术大学、中华人民共和国武汉海关、中国水产科学研究院黄海水?产?研?究?所、中?华?人?民?共?和?国?湛?江

海关、广西壮族自治区水产科学研究院。

本文件主要?起?草?人:贾?鹏、温?智?清、吴?江、刘?荭、张?娜、王?津?津、郑?晓?聪、刘?莹、邱?亮、陈?孝?宇、童?桂?香、

杨冰。

Ⅰ

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十足目虹彩病毒1感染检疫技术规范

1?范围

本文件规定了十足目虹彩病毒1(DIV1)感?染?的?临?床?症?状,规?定?了?DIV1?的?套?式?PCR?检?测?方?法、实

时荧光?PCR?检测方法和综合判定。

本文件适用于?DIV1感染的检测和诊断。

2?规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必?不?可?少?的?条?款。其?中,注?日?期?的?引?用?文

件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包?括?所?有?的?修?改?单)适?用?于

本文件。

GB/T6682 分析实验室用水规格和实验方法

GB/T18088?出入境动物检疫采样

GB19489?实验室 生物安全通用要求

3?术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4?缩略语

下列缩略语适用于本文件。

a i iATPase:磷酸腺苷酶(

a i i

c ic?lCTAB?十六烷基三甲基溴化胺(etyl

c i

c?l

Ct循环阈值(ycethreshold)

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d i li i

DNA?脱氧核糖核酸(eoxyrbonucecacd)

d l???i iedNTPs?三磷酸脱氧核糖核苷酸

d l???i i

e

EB?溴化乙锭(thidiumbromide)

i iMCP?主要衣壳蛋白?(majorcapsd

i i

i ipPCR?聚合酶链式反应(olymerase

i ip

5?仪器和设备

1235. 冷冻离心机。

1

2

3

5. 微量移液器。

5. PCR?扩增仪。

45. 实时荧光?PCR?仪。

4

1

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5675. 水平电泳仪。

5

6

7

5. 凝胶成像仪。

5. 超净工作台。

85. 二级生物安全柜。

8

6?试剂和材料

16. 水:符合?GB/T6682中一级水的规格。

1

2345 16. 阳性对照:感染?DIV1的甲壳类动物组织,

2

3

4

5 1

6. 阴性对照:未感染?DIV1的甲壳类动物组织。

6. 空白对照:无?DNA?酶的水。

6. 抽提缓冲液,按?A.?配制。

676. 无水乙醇?,分析纯,使用前预冷至-20?℃。

6

7

6.?70%乙醇。

8 29 16. 蛋白酶?

8 2

9 1

6. 乙酸铵(0?mg/mL)。

i 8p1 21 21 216.0?

i 8p1

21

21

21

6.1?酚/三氯甲烷/异戊醇(5∶24∶1)。

6.2?三氯甲烷/异戊醇(4∶1)。

6.3?TE?缓冲液,按?A.?配制。

316.4?TBE?电泳缓冲液,按?A.?配制

31

16.5?Taq?酶:-20?℃保存,避免反复冻融或温度剧烈变化。

1

/d d1 41 516.6?dNTPs:含?dCTP、GTP、ATP、TTP?各10

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