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一种大片段DNA跨物种转移辅助菌株的构建方法及应用.pdfVIP

一种大片段DNA跨物种转移辅助菌株的构建方法及应用.pdf

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    本发明属于基因工程和微生物技术领域，具体涉及一种大片段DNA跨物种转移辅助菌株的构建方法及应用。所述构建方法包括：将出发菌株大肠杆菌的DNA甲基化系统进行敲除，获得大肠杆菌DNA甲基化系统缺失突变株；改造接合转移辅助质粒pUZ8002，将质粒自带的卡那霉素抗性基因和四环素抗性基因进行敲除，并添加氨苄青霉素抗性基因，便于抗性筛选；将改造后的接合转移辅助质粒导入大肠杆菌DNA甲基化系统缺失突变株，经筛选获得正确的转化子，向其中导入Red/ET同源重组辅助质粒pSC101‑ccdA‑gbaA即得。本发

    (19)国家知识产权局

    (12)发明专利申请

    (10)申请公布号CN117603898A

    (43)申请公布日2024.02.27

    (21)申请号202311602883.9C12R1/465(2006.01)

    (22)申请日2023.11.

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