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二、选择题
【A型题】
1.B2.D3.B4.A5.D
6.A7.E8.D9.B10.D
【X型题】
1.ABCD2.ABCD3.ABC4.ABCD5.ABC
三、简答题
1.细胞培养的生存条件有哪些?
答:培养细胞需要特定的培养基和培养设备,需要特有的环境,包括恒定的温度(37C)、湿度
(95%)和气体(通常为5%CO成分)。培养细胞所需营养物质包括糖、氨基酸、维生素、无机离
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子、微量元素等,尚需加一定量的动物血清(胎牛或小牛血清)。为防止污染,培养液中尚需加一定
量的抗生素。
2.常见细胞培养箱有哪些类型?
答:常用培养箱有电热恒温培养箱、二氧化碳培养箱和厌氧培养箱等。电热恒温培养箱有隔水
式电热恒温培养箱和气套式电热恒温培养箱两种;二氧化碳培养箱种类繁多,根据其工作原理,可
以分为气套式CO培养箱、水套式CO培养箱、红外CO培养箱、高温灭菌培养箱、光照低温培养
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箱、恒温恒湿培养箱等。
3.各种细胞培养箱可应用于哪些方面?
答:电热恒温培养箱适合于普通的细菌培养和封闭式细胞培养,并常用于有关细胞培养的器材
和试剂的预温及恒定。CO培养箱已广泛应用于各种组织和细胞的培养、病毒增殖、细菌培养、遗
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传工程,试管工程和克隆技术等,用于研究各种因素对细胞的结构、功能和各种生命活动规律的影
响等临床医学和检验医学的工作。
4.如何检测培养细胞霉菌和细菌的污染?
答:一般肉眼可见在培养液中形成白色或浅黄色飘浮物;倒置显微镜下可见于细胞之间悬浮飘
荡在培养液中的纵横交错穿行的丝状、管状及树枝状菌丝或卵圆形单细胞真菌,为霉菌污染。培养
液短期内颜色变黄并出现明显混浊现象;倒置显微镜下观察,可见培养液中有大量细小的圆球状颗
粒飘浮,有时在细胞表面和周围有大量细菌存在,为细菌污染。
5.如何检测培养细胞的支原体污染?
答:①相差显微镜检测,将细胞接种于事先放置于培养瓶内的盖玻片上,24h后取出,用相差
油镜观察,支原体呈暗色微小颗粒位于细胞表面和细胞之间;②荧光染色法,用荧光染料使支原体
DNA着色,置荧光显微镜下观察,可见散在于细胞周围或附于细胞膜表面的亮绿色小点为支原体污
染;③电镜检测,用扫描电镜或透射电镜观察支原体;④DNA分子杂交检测或支原体培养等方法。
6.简述气套式CO培养箱的结构特点。
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答:①直接加热,加热组件环绕所有外夹套,能均匀加热并用玻璃纤维绝缘包绕;②箱体不需
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注水、排水,无溢出或缺水警报;③CO2取样口处于箱体的前部;④与水套式相比重量较轻;⑤采
用过温保护系统,当温度过高可自动切断电源;⑥可选配HEPA过滤系统,箱体内气体每分钟被过
滤一次,快速达到100级气体质量,能为细胞提供理想环境。
7.简述厌氧培养系统保持箱内的厌氧状态的工作原理。
答:通过催化除氧系统和自动连续循环换气系统保持箱内的厌氧状态。
(1)通过自动化装置自动抽气、换气的自动连续循环换气系统,使箱内最大程度地减少O含
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量,产生厌氧状态。自动换气功能可由按钮控制,培养箱与真空泵相连,当所有要转移的物品被放
入缓冲室后,关闭外门,进行自动去除缓冲室中的氧气。循环换气预设三个气体排空阶段、两个氮
气净化阶段和一个缓冲室平衡气压阶段。其换气过程是:①气体排空;②N净化;③气体排空;④
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