- 1、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
- 5、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
稳定转染Dicer基因对HELF细胞功能的影响的任务书
任务描述:
目的:确定稳定转染Dicer基因对人胎肺纤维细胞(HELF)功能的影响。
背景:在动物体内,microRNAs(miRNAs)起着重要的调节基因表达的作用。Dicer是miRNA的重要切割酶,在miRNA的生物合成过程中起着重要的作用。一些研究表明,在肺部疾病中,Dicer可能与疾病发展密切相关。因此,了解Dicer对人肺细胞功能的影响具有重要的临床意义。
任务内容:
1.构建包含Dicer基因的表达载体,并将其稳定转染到HELF细胞中。
2.采用Westernblotting和实时荧光定量PCR(qPCR)技术,确认转染Dicer基因的稳定细胞系能够明显表达该基因,且miRNA的表达量是否发生了变化。
3.通过细胞增殖、凋亡、周期和迁移等常规实验方法,探讨转染Dicer基因对HELFS细胞功能的影响。
4.分析实验结果,并总结Dicer基因对HELFS细胞功能的影响。
所需设备与试剂:HELF细胞、质粒DNA、转染试剂、Westernblotting试剂盒、qPCR实验试剂盒、CCK-8试剂盒、Transwell细胞迁移试剂盒等。
时间安排:本实验预计需两个月完成,具体时间安排如下:
第一周:HELF细胞培养、质粒DNA提取。
第二周:质粒DNA限制性酶切、测序检测。
第三周:质粒DNA纯化、细胞转染。
第四周:Westernblotting检测、RNA提取。
第五周:qPCR分析、CCK-8实验。
第六周:Transwell细胞迁移实验。
第七周:结果分析、报告撰写。
第八周:修订报告、准备演讲。
原创力文档


文档评论(0)