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制药用水检测项目及注意事项

第一部分、制药用水所检项目有哪些？

制药用水根据不同的使用范围分为饮用水、纯化水、注射用

水和灭菌注射用水。这里我们只针对纯化水（PW）和注射用

水（WFI）进行分析讨论。

根据中国药典规定，PW需检验项目为：性状、酸碱度、氨、

硝酸盐、亚硝酸盐、电导率、总有机碳（TOC）、不挥发物、

重金属、微生物限度。

WFI所需检验项目与PW相比，将酸碱度更换为pH值，增加

了细菌内毒素控制，其余检验项目与PW基本相同，但是微

生物的控制标准要严于PW的标准。

第二部分、微生物限度检测方法的确认

根据非无菌产品微生物限度检测方法的要求，应进行培养基

适用性检查和计数方法适用性试验。纯化水培养基适用性检

查方面，相应进行R2A琼脂培养基的适用性检查，菌株为铜

绿假单胞菌和枯草芽孢杆菌。以及无菌培养试验。

方法：取不大于100cfu菌液，于购买的R2A琼脂培养基，

快速涂布，每一菌株平行2个平板。同样操作涂布与中检院

购买的对照培养基，培养5天。

无菌培养试验：取2平皿，作为阴性对照培养。

标准：被测培养基上的菌落平均数与对照培养基上的菌落平

均数比值应在0.5-2之间，菌落形态、大小一致。

无菌培养，培养基上无微生物生长。

纯化水计数方法适用性方面，水作为无抑菌作用的溶剂，进

行微生物回收试验意义不大，因此，应不进行计数方法适用

性试验。R2A培养基，营养欠丰富，有利于损伤微生物的回

收，培养时间不低于5天。

第三部分、准备工作注意哪些？

（1）仪器设备及耗材：

检测前要根据所要检测的项目，检查所用仪器/设备（如天

平、pH计、电导率仪、培养箱等）是否经过了校准，是否在

校准效期内，有些仪器还需要使用前校准或日校，比如天平，

pH计。

微生物限度检验所用的生物安全柜（或超净工作台）、微生

物过滤系统和培养箱应保证在确认效期内。用到的关键耗材，

如微孔滤膜及滤杯等物料应保证其无菌性，可购买一次性无

菌过滤器，也可在经验证的灭菌程序下灭菌，并在经验证的

有效期内使用，但微孔滤膜不建议用户自行湿热灭菌，因为

湿热灭菌可能会引起滤膜孔径的改变，除非有充分的证据证

明灭菌后的滤膜仍满足使用需求。这些的确认合格与否，将

直接关系到检验结果的准确性。

细菌内毒素的检验可以在超净工作台内进行，也可以在普通

试验台上进行试验操作，但仍需注意操作环境的洁净状况，

操作房间应保持较好的卫生状况，避免环境对测试结果的影

响。

（2）试剂试液

检查要检测项目所用到的试剂是否在有效期内。

pH计校准所用标准缓冲液是否合适，一般定点用的缓冲液与

所测样品的pH值接近，样品的pH值要在定点和调斜率的缓

冲液pH值范围内。pH缓冲液的温度应在25℃±2℃范围内。

检测微生物限度所用的培养基为R2A琼脂培养基，配制时应

使用在有效期及开瓶有效期内的干粉培养基，培养基应进行

培养基适用性检查，中国药典规定，如培养基配制过程已经

过验证，则可以只针对每批干粉培养基进行适用性检查，EP

和USP则要求须对每个配制批进行检查。

检测细菌内毒素所用鲎试剂和内毒素标准品是否在效期内，

凝胶法鲎试剂应进行灵敏度复核试验，光度法用鲎试剂应进

行标准曲线的可靠性试验。

第四部分、影响电导率结果的因素？

影响电导率测定结果的因素有样品的温度和可溶性气体（如

空气中的CO2）。

将取样容器取满，密封，应在尽量短的时间内进行测定，能

够减少可溶性气体对测定结果的影响。

第五部分、测定TOC时的注意事项？

TOC测定时，应避免有机物和CO2对测定结果的影响。

取样时应采用密闭玻璃容器，容器顶空应尽量小，取样后，

应立即测试，以减少塞子和容器对测定结果的影响。

第六部分、测定需比色的检验项目时的注意事项

在测定硝酸盐、亚硝酸盐、重金属和氨时，均采用比色法，

需要注意遵守平行原则，须采用同套的比色管，对比时所有

比色管中液体应体积相同。观察方式有两种，一种是在白色

背景上自上而下透视，适于色泽较浅时采用，另一种是在白

色背景前平视观察，适于色泽较深时采用。同时检验人员不

应有色弱或色盲等。

第七部分、微生物限度检查时注意事项？

人员应经过培训且考核合格，应具备微生物的基础知识和洁

净室的行为规范。进入洁净区前后应检查洁净区内压差及温

湿度是否在规定范围内；准备所需物品和样品经消毒剂擦拭

消毒后，放入传递窗对表面进行紫外消毒，紫外消毒只能作