11.实验四-精巢和卵巢的结构.pptVIP

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实验三精巢、卵巢实验内容:(一)小鼠和鱼精巢、卵巢组织学结构(二)小鼠和鱼类精巢、卵巢组织学标本制备(冰冻切片)(一)小鼠和鱼精巢、卵巢组织学结构1、材料(1)猫或鼠的精巢、卵巢(2)鱼精巢和卵巢组织学观察

哺乳动物精巢、卵巢结构精巢构造1.育精管2.生殖细胞(1)精原细胞(2)初级精母细胞(3)次级精母细胞(4)精子胞(5)精子(6)支持细胞

卵巢结构:1、初级卵泡:周围有一层滤泡细胞+卵泡细胞2、次级卵泡:周围有多层滤泡细胞(颗粒层)卵丘,卵泡腔,透明带,卵泡膜3、成熟卵泡:放射冠4、黄体:5、白体:鱼类卵子发育I时相:细胞园形其外围有几个滤泡细胞。II时相:卵细胞+卵外有一层滤泡细胞组成的滤泡上皮。III时相:卵细胞卵+外有二层滤泡细胞。放射环,液泡。IV时相:放射条纹,其外为两层滤泡细胞卵黄几乎充满卵母细胞。V时相:完成营养物质的积累,核偏于一极可以排卵。细胞核(一)精巢、卵巢组织学标本制备1、冰冻切片概述及原理:LEICACM1900型恒冷箱切片机具有一个完全封闭式的恒冷箱,工作时可24小时制冷,使箱内温度常年保持在-20℃的工作状态,并具有自动除霜的功能。此外,它还具有一个独立的样品冷却系统,使生物样品被迅速冷冻,达到一定硬度后,即可切片。样品的前进与后退,由恒冷箱外的电动按钮控制。技术指标

?①恒冷箱冷却系统:????温度范围:0~-35℃

????自动除霜:9分钟/1次/24小时

?②样品冷却系统:

???温度范围:-10~-50℃

???手动除霜:10分钟

?③切片厚度:

????0-60μm(一般常用8-10μm)主要部件

?①恒冷箱

?②样品冷却系统

?③切片机

?④不锈钢刀片主要应用领域

??主要用于原位杂交、免疫组化时的生物组织样品的制片以及常规组织样品的制片主要特点

?①性能稳定

?②制片快捷2、实验操作1、取小鼠和鱼的卵巢、精巢或其它组织。2、用包埋剂包埋组织(冰冻切片前载玻用明胶处理)。3、冰冻切片(厚度为8μm)4、染色:苏木精1分钟,在清水中冲洗10min。材料由红色变为兰色。1%伊红Y滴液得2-3分钟,流水冲洗10-30min。5、脱水:30%、50%、70%、80%、90%、95%、100%的酒精中顺次脱水,每级3-5min纯酒精和松节油的混合液(1:1)中5min入松节油5min,6、封片:用加拿大树胶封藏7、显微观察各组织结构特征作业1、实验报告:绘出卵巢或精巢图。2、考查(记分)3、结果交一张好的样品片,简单绘制组织结构图(当场打分)。今天完不成的到下次完成。**

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