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生化试验小技巧

——根据丁香园中一贴子整理而得，兼为经验。

SDS

SDS配制过程中，浓缩胶与分离胶可预先配好大体积（如100ml）预制胶，储存在4度冰箱（注：10%APS，TEMED不加），每次配置时只需吸取所需体积的预制胶加入相应体积APS，TEMED即可，预制胶可储存半年以上，能节省很多时间，更重要的是，可大大减少与丙稀酰胺的接触，减少中毒。

胶配好后，若过夜使用，待凝聚后不要拔下梳子，把含胶玻璃板从制胶槽取下，注意玻璃板上下两边缘会有气体，所以需要加一点电泳缓冲液以避免胶内水分蒸发，用保鲜膜何上然后放4度过夜，第二天在电泳槽内直接拔下梳子即可使用。

配置分离胶时因胶凝时收缩常导致加样孔变浅，可以将加剩的胶放入4。。以降低凝聚速度，而将凝胶放入37度促聚，并随时用4°C加剩的胶补充下降的胶面；另外将胶横放与水平面成10度角也可以减少收缩的影响。

丙烯酰胺放置时间过长（超过一年），会吸水潮解，导致胶不凝。

凝胶时温度高凝胶快，但过高时，会影响交连物的孔径大小，25C为宜。

氧气是胶凝固的终止剂，所以尽量避免胶中气泡出现。

大肠表达检测时，一般要煮样，但煮出来时常较稠，用8M尿素重悬细胞后再煮效果较好。

配好的10XTBE经过高压灭菌后，不会形成沉淀，可以用很长时间，而且跑出的条带也很漂亮。

上样时，最后保证上样量一样，包括体积，当体积不同时，可以加缓冲液补