实验室及基本操作.pptVIP

作用效力吲哚乙酸（IAA）吲哚丁酸（IBA）萘乙酸（NAA）二氯苯氧乙酸（2,4-D）第31页，课件共66页，创作于2023年2月2）细胞分裂素类促进细胞分化；有利于细胞分裂和愈伤组织的形成；促进细胞分裂与扩大，可使茎增粗，而抑制茎的伸长；诱导芽的分化，促进侧芽发生。◆激动素：最主要的用途是诱导芽的形成。◆玉米素：是一种天然激素，价格昂贵，其作用稍差于苄氨基嘌呤。6-苄氨基腺嘌呤（6-BA）：具有高效、稳定、廉价和易于使用等特点，是组织培养最常用细胞分裂素类。主要作用是促进芽的形成，也可以诱导愈伤组织发生。第32页，课件共66页，创作于2023年2月作用效力玉米素ZT6-苄氨基腺嘌呤6-BA激动素KT腺嘌呤第33页，课件共66页，创作于2023年2月3）赤霉素赤霉素有127种，生理活性及作用的种类、部位、效应等各有不同，培养基中添加的是GA3，主要用于促进幼苗茎的伸长生长，促进胚状体发育成小植株。第34页，课件共66页，创作于2023年2月5.培养材料的支持物琼脂固体培养时琼脂是最好的固化剂。琼脂的用量在0.8-1.0%之间。凝固能力除与原料、厂家的加工方式有关外，还与高压灭菌时的温度、时间和pH值等因素有关。其它：玻璃纤维、滤纸桥、海绵、卡拉胶等。第35页，课件共66页，创作于2023年2月6、其他成分抗生素物质：有青霉素、链霉素、庆大霉素等,可防止菌类污染，减少培养中材料的损失。抗氧化剂：易褐化的材料。活性炭：茎尖初代培养，加入适量活性炭，可以吸附外植体产生的致死性褐化物；新梢增殖阶段，活性炭可明显促进新梢的形成和伸长；活性炭在生根时有明显的促进作用。7、pH值喜光、耐旱、耐盐碱：pH值中性；喜湿、耐阴、喜酸：pH值偏酸。培养基灭菌后，pH值一般下降。第36页，课件共66页，创作于2023年2月（四）培养基的选择几种基本培养基的特点1）富集元素平衡培养基---MS培养基（典型代表）无机盐浓度高，元素间的比例较适合；缓冲性能好，某些元素略有损失不会影响离子平衡；营养丰富，不需再加入水解蛋白等有机成分；微量元素种类较全，浓度较高；适合多种植物，用途广泛。与MS相类似的培养基，LS、BL、BM、ER培养基等。第37页，课件共66页，创作于2023年2月2）硝酸钾含量较高的培养基硝酸钾的含量高，铵态氮的含量低，含有较高的盐酸硫胺素（VB1）。如，B5（水稻成熟胚愈伤组织分化时用其微量元素部分）、N6（禾谷类植物的花药和花粉培养）、SH培养基。第38页，课件共66页，创作于2023年2月3）中等无机盐含量的培养基

大量元素无机盐约为MS的一半；

微量元索种类减少而含量增高；

维生素种类比MS多。

如，H、Nitsch、Miller培养基。

4）低无机盐培养基

无机盐含量很低，一般为MS的1/4；

有机成分含量也很低；

多用作生根培养基。

如，White、WS、HE、HB培养基。第39页，课件共66页，创作于2023年2月2.培养基选择1）背景调查对该供试植物分类地位、生理特性、繁殖、栽培条件及品种类型等有充分的了解。应详细查阅前人对该植物的研究工作，总结分析前人工作的成功和不足之处，从而在此基础上确定基本培养基类型。第40页，课件共66页，创作于2023年2月2）选择原则同一物种的不同亚种、品种间的基本培养基类型基本相同；同一植物的不同组织、器官的基本培养基类型基本相同；营养成分需求与田间栽培有相似性；无机盐浓度是基本培养基类型的重要因素，应该作为培养基选择的重要参数；有机成分主要是种类的变化，每种成分含量的变化不大；在确定基本培养基类型后，研究最适的蔗糖浓度。第41页，课件共66页，创作于2023年2月3）激素的选择原则生长素主要功能是促进细胞分裂、诱导愈伤组织和生根等，各种生长素的强度按以下排列而减弱：2,4-D、NA