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本发明提供了一种巢式位点特异性单引物PCR方法及其应用。本发明提供的方法从每个遗传位点上鉴定出3个引物，引物A、B、C，首先，在60℃条件下引物A在基因组的特定位置合成ssDNA，随后的25℃，使得引物A有机会退火至刚刚合成的靶ssDNA上未知区域的某些位点，这样便成功实现了引物A的步移。随后的第二轮和第三轮PCR中，引物B和引物C完成相同的步移，此方法成功建立；而非目标产物在第二轮和第三轮反应过程中被抑制。本发明提供的方法能够通过一段已知序列即可探索其侧翼的未知序列，同时本发明能够应用于基因测
(19)国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号CN117721189A
(43)申请公布日2024.03.19
(21)申请号202311541767.0
(22)申请日2023.11.18
(71)申请人南昌大学
地址330000
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