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苹果斑点落叶病抗性基因RAPD标记筛选研究的任务书

任务书

1.研究背景

苹果斑点落叶病是一种主要侵害苹果树幼嫩叶片的病害，可引起叶面灰白色病斑，合并并发症后还会出现落叶现象，严重影响果树生长和果实产量。传统防控方法主要依赖化学农药喷洒，但随着消费者对食品安全和环境保护意识的提高，对绿色防治方法的需求也越来越大。因此，研究苹果斑点落叶病的遗传抗性机制，筛选出相关基因，并利用分子标记技术进行检测和筛选，对苹果树的抗病育种具有重要意义。

2.研究任务

本研究旨在利用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术，筛选出与苹果斑点落叶病抗性相关的分子标记，为苹果树的抗病育种提供理论依据。具体任务分为以下几个方面：

(1)收集苹果斑点落叶病相关品种或材料，进行分类鉴定，并筛选出与抗病相关的优良品种。

(2)采用RAPD技术对筛选出的优良品种进行DNA分析，筛选出与抗病相关的RAPD引物。

(3)优化PCR反应条件，进行引物扩增，对扩增产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳分析，并确定与抗病相关的RAPD标记。

(4)对筛选出的RAPD标记进行验证和鉴定，以确定其与苹果斑点落叶病抗性相关性。

(5)对鉴定出的RAPD标记进行应用验证，进行抗病品种的筛选和育种。

3.研究计划

(1)样品准备：收集苹果斑点落叶病相关品种或材料70个，包括抗病和易感品种各半，进行分类鉴定，并筛选出10个抗病性较强的品种作为实验材料。

(2)DNA提取和RAPD引物设计：采用CTAB法对选定的实验材料进行DNA提取，并采用软件分析工具筛选出适合的RAPD引物，选择4-6个引物进行PCR扩增。

(3)PCR反应和DNA分析：将PCR扩增产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳分析，鉴定和筛选出与抗病相关的RAPD标记。

(4)标记验证和应用验证：对鉴定出的RAPD标记进行验证和鉴定，以确定其与苹果斑点落叶病抗性相关性，并进行应用验证，进行抗病品种的筛选和育种。

(5)论文撰写：总结实验结果，撰写研究论文并完成终期报告。

4.研究预期成果

(1)筛选出与苹果斑点落叶病抗性相关的RAPD标记。

(2)鉴定与筛选出具有苹果斑点落叶病抗性的优良品种。

(3)提高苹果树育种抗逆性和抗病性的水平。

(4)在苹果树的抗病育种上提供理论依据，推广应用相关科技成果。