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小鼠CD19胞外区基因和人组蛋白HleC端基因的克隆及其原核表达的任务书

一、任务简介

本次任务旨在克隆小鼠CD19胞外区基因和人组蛋白HleC端基因，并在原核表达系统中进行表达，获取目标蛋白纯化所需的细胞基因。

二、任务步骤

1.设计引物并进行PCR扩增：设计特异性引物，根据NCBI数据库中小鼠CD19胞外区基因和人组蛋白HleC端基因的序列信息进行PCR扩增。

2.克隆目标基因：将PCR扩增得到的目标基因利用限制性内切酶和连接酶依次进行消化连接，构建目标基因的重组质粒并进行转化。

3.测序验证：对所克隆的目标基因进行测序验证，确认其准确性。

4.基因的原核表达：将目标基因插入大肠杆菌表达载体中并进行转化，通过菌液分装、发酵等步骤表达目标蛋白。

5.目标蛋白纯化：采用各种方法对表达的目标蛋白进行纯化和鉴定，如亲和柱层析、离子交换层析、凝胶过滤层析等。

三、任务要求

1.收集和分析小鼠CD19胞外区基因和人组蛋白HleC端基因的序列信息，并正确设计引物进行PCR扩增。

2.对PCR扩增的产物准确鉴定，并用限制性内切酶和连接酶依次进行消化连接，构建目标基因的重组质粒。

3.对所构建的重组质粒进行测序，保证序列的正确性。

4.将所构建的重组质粒插入大肠杆菌表达载体中，进行转化。

5.对表达的目标蛋白进行纯化和鉴定，保证目标蛋白的高纯度和稳定性。

四、任务成果

1.小鼠CD19胞外区基因和人组蛋白HleC端基因的PCR扩增产物

2.构建的目标基因的重组质粒

3.目标基因的测序结果

4.目标基因的原核表达结果

5.目标蛋白的纯化和鉴定结果