2022年人教版选修三专题1第1节DNA重组技术的基本工具(23张).ppt

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烟草据WTO调查:2004年全世界因狂犬病致死人数约5.5万人中国卫生部通报:2004年7月,狂犬病列法定报告传染病死亡数之首。发病死亡率近100%能产生狂犬病抗体蛋白的转基因每100kg猪或牛的胰腺中仅可提取4~5g。1979年,美国将人的胰岛素基因重组到大肠杆菌内,实现了细菌生产胰岛素,大大降低了生产成本。治疗糖尿病特效药——据WTO调查:2005年全世界约有糖尿病患者1.8亿人,我国约6000万。胰岛素思考:转基因技术实现了一种生物的某些性状在另一种生物中表达。这些性状的表达与我们学过的基因的什么过程有关?密码子在生物界是的!DNA(基因)mRNA蛋白质(性状)转录翻译通用问题探讨:苏云金杆菌含有一种可以合成毒蛋白的基因。让细菌的毒蛋白基因在棉花细胞中表达,可培育出抵抗棉铃虫害的抗虫棉。

想一想需要做哪些关键工作?苏云金杆菌毒蛋白普通棉花抗虫棉一、“分子手术刀”二、“分子缝合针”三、“分子运输车”转基因思考:⒈自然界是否存在一种生物的DNA进入另一生物的情况?⒉动物容易让外来DNA侵入自身而得以遗传吗?为什么?植物呢?⒊单细胞生物,容易遭到入侵吗?⒋单细胞生物并没有在进化中灭绝,而是产生了一些特殊的酶来防范。这些酶应该有什么特点?可能酶能识别外来侵入的DNA并将其分解,而对自身的DNA不能起作用。“分子手术刀”——限制性核酸内切酶一、限制性核酸内切酶——“分子手术刀”⒈主要来源:⒉种类与命名:⒊作用特点:⒋作用结果:原核生物一、限制性核酸内切酶——“分子手术刀”⒈主要来源:⒉种类与命名:⒊作用特点:⒋作用结果:几种最常用的限制酶及其识别和作用位点EcoRⅠSamⅠHindⅢBamHⅠ识别特定核苷酸序列原核生物产生黏性末端或平末端Goon,切断磷酸二酯键GAATTC

CTTAAGCCCGGG

GGGCCCAAGCTT

TTCGAAGGATCC

CCTAGG⒉种类与命名:现在已经从约300种微生物中分离出了约4000种限制性内切酶(限制酶)。EcoRⅠSmaⅠ粘质沙雷氏杆菌(Serratiamarcesens)大肠杆菌(EscherichiacoliR)练习:流感嗜血杆菌的d菌株(Haemophilusinfluenzaed)中先后分离到3种限制酶,则分别命名为:HindⅠ、HindⅡ和HindⅢSmaⅠ平末端平末端EcoRⅠ黏性末端黏性末端EcoRⅠ黏性末端黏性末端Goback重复演示……GAATTC…………CTTAAG…………GAATTC…………CTTAAG……EcoRⅠ……GAATTC…………CTTAAG…………GAATTC…………CTTAAG……不同来源的DNA片段混合将不同种来源的DNA片段连接起来生物A基因片段生物B基因片段……GAATTC…………CTTAAG…………GAATTC…………CTTAAG……酶切二、“分子缝合针”——DNA连接酶⒈分类:⑴E·coliDNA连接酶⑵T4DNA连接酶⒉作用:P5可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来,E·coliDNA连接酶或T4DNA连接酶即恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键T4DNA连接酶还可把平末端之间的缝隙“缝合”起来,但效率较低DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗?为什么?不是一回事。相同点:形成磷酸二酯键但是:1)DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核酸片段上,形成磷酸二酯键;而DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键2)DNA聚合酶需要以一条DNA链为模板;而DNA连接酶不需要模板。三、“分子运输车”——基因进入受体细胞的载体⒈载体需要的条件:⑴有1~多个限制酶切点⑵对受体细胞无害⑶导入基因能在受体细胞中复制、表达⑷有某些标记基因,便于筛选⒉常用运载体:⑴细菌的质粒⑵噬菌体或某些动植物病毒⑶假如目的基因导入受体细胞后不能复制或不能转录,转基因生物能有预想的效果吗?⑴作为分子运输车——载体,如果没有切割位点将会怎样?⑵霍乱菌的质粒多个限制酶切点,你会用它来做分子运输车吗?⑷目的基因有没有进入受体细胞,如何去发现?<难点探究>最常

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