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大豆提取物中异黄酮成分的分离与纯化的中期报告

一、分离工艺优化

1.1溶剂选择

异黄酮是一种黄色晶体，溶于有机溶剂和酸性水溶液中。本实验采用乙醇和甲醇作为提取和分离的主要溶剂。

1.2比例优化

本实验采用的是以大豆提取物为原料，利用硅胶柱层析分离纯化异黄酮。在该过程中，提取溶液在不同浓度下与硅胶混合物进行平衡，得到不同成份的分离效果不同。通过考察不同比例下异黄酮的得率和纯度，最终确定分离工艺以1：1甲醇-乙醇作为合适的比例。

1.3硅胶层析工艺优化

硅胶层析柱型号为30×10cm，其填充相为200-300目硅胶。通过调整大豆提取物中异黄酮在柱中停留时间、溶剂流速等实验参数，最终确定了硅胶层析分离样品的最佳条件为：硅胶相充填前应水洗（3~4次），样品预先溶于甲醇，硅胶床体积为50-70mL，初加速度0.5-1.0cm/min，分别以1：1甲醇和乙醇为淋洗液，淋洗流速0.5-1.0mL/min，吸收波长280nm。

二、分离纯化效果

最终实验得到纯度高达95%以上的异黄酮，其总收率为60%左右，符合预期结果。

三、结论

通过实验分析，本实验确定的以硅胶层析分离大豆提取物中异黄酮的工艺条件为：1：1甲醇-乙醇作为提取溶剂，硅胶相充填前水洗，样品预先溶于甲醇，床体积50-70mL，加速度0.5-1.0cm/min，流速0.5-1.0mL/min，吸收波长280nm。该工艺能够高效地纯化出纯度达到95%以上的异黄酮。