动物性食品中抗生素及其他激素残留的检测.pptxVIP

5.3.2动物性食品中抗生素及其他激素残留的检测巴音郭楞职业技术学院食品理化检验技术学习内容食品中抗生素的测定0112抗生素种类繁多，结构复杂，测定方法各不相同。因而给检测工作带来了许多困难。食品中抗生素的测定34抗生素的测定方法进展很快。主要可分为微生物测定法，化学测定法和物理测定法三大类。食品中抗生素的测定以微生物测定法应用较广。因其测定原理基于抗生素对微生物的生理机能和代谢作用的抑制，试剂数量少，仪器简单。01牛乳中TTC测定法，肉中四环素杯蝶测定法都属于微生物分析法，这类方法测定时间较长，且结果误差较大。02食品中抗生素的测定化学测定法和物理测定法则利用抗生素中某些基团的特殊性质或反应来测定其含量的分析方法。比色法荧光分光光度法气相色谱法高效液相色谱法高效液相色谱HPLC（一）高效液相色谱法的特点分离效能高选择性高检测灵敏度高分析速度快对于高沸点、热稳定性差、相对分子质量大的有机物原则上都可用HPLC进行分离、分析。目前已广泛应用于化工、食品、医药、生化、卫生、环境保护和高能化合物等生产和科研工作中。高效液相色谱HPLC（二）检测器(detector)检测器是液相色谱仪的关键部件之一。对检测器的要求是：灵敏度高，重复性好、线性范围宽、死体积小以及对温度和流量的变化不敏感等。检测器的主要性能要求灵敏度（sensitivity）高（检测限低）噪音（noise）低适用范围广（通用型、专属型）线性范围（linearrange）宽重复性（repeatability）好食品中抗生素的测定(三）固定相和流动相固定相应符合下列要求：颗粒细且均匀；传质快；机械强度高，能耐高压；化学稳定性好，不与流动相发生化学反应。食品中抗生素的测定(三）固定相和流动相对流动相的要求：与固定相不发生化学反应。对试样有适宜的溶解度。与检测器相适应。纯度高，粘度小。低粘度流动相如甲醇﹑乙腈等可以降低柱压，提高柱效。四环素类抗生素残留量的测定食品中四环素类抗生素的测定多采用微生物法。原理样品经提取，用离子交换树脂分离，甲醇溶剂洗脱，经浓缩，残渣用Mcllvaine缓冲液溶解，经荧光鉴定，然后用微生物法进行定量测定。本方法的最低检出量为0.05mg/kg。四环素类抗生素残留量的测定其它抗生素也可用此法进行测定，试验的菌种不同或培养基不同。测定青霉素为金黄色葡萄球菌，链霉素或双氢链霉素为枯草杆菌（6633），氯霉素为卵黄色八叠球菌（9341），新生霉素为白色葡萄球菌。(一）原理在酸性条件下，链霉素可与二硝基苯肼反应生成黄色的链霉素二硝基苯腙；多余的试剂经乙酸丁酯提取除去后，于430nm波长处测吸光度，以标准曲线求出样品中链霉素的含量。链霉素残留量的测定logo高效液相色谱HPLC原理当乳中含有抗生素时，标准菌株嗜热链球菌的生长受到抑制，不能将指示剂2,3,5—氯化三苯基四氮唑（TTC）还原为无色。反之，当乳中抗生素不存在时，加入的标准菌株，就会大量生长繁殖，而且将TTC还原为红色化合物。其红色强度与细菌数量成正比。本法对各种抗生素的最低检出量：青霉素为0.004IU/mL，链霉素为0.5IU/mL，庆大霉素为0.4IU/mL注意事项本法的正确性与菌种的活力有密切关系。如菌种活力减弱时，应多次反复传代加强活力。制备培养基的乳要绝对无抗生素存在；操作所用试管、吸管均须经灭菌。每次检验每个样品应一式二份，另外要作阴性、阳性对照各2管，阴性对照管作无抗生素乳9mL，阳性对照管用无抗生素乳9mL加抗生素。水浴培养要避光，保持37℃，水面高于被检样品，判断要迅速；检样经80℃水浴加热5min，要严格掌握。食品中激素的测定动物性食品中性激素的含量极微，所以一般的测定方法受到了限制，较常用的方法有薄层色谱法、荧光分析法、气相色谱法和高效液相色谱法等。其中高效液相色谱法具有更大的优越性，并有取代其它方法之势。食品中激素的测定性激素总量的测定（薄层色谱法）原理样品中的性激素经有机溶剂提取、浓缩，在硅胶G薄层板上点样、展开后，以硫酸显色，与标准斑点进行比较，从而达到定性和半定量的目的。食品中激素的测定添加标题添加标题添加标题添加标题添加标题硅胶H硅胶中未加入粘合剂硅胶G硅胶中加入粘合剂石膏硅胶S硅胶中加入粘合剂淀粉硅胶HF254硅胶H中加入波长254nm荧光物质硅胶GF254硅胶G中加入波长254nm荧光物质注意事项薄层色谱法可用于性激素的鉴别、半定量测定以及含量测定前的分离。由于性激素的种类多，故所用的溶剂系统、吸附剂、展开剂和显色剂不能一概而论。可根据具体情况，挑选效果最佳者使用。雌激素残留量的测定（己烯雌酚的测定）雌激素残留量的测定荧光分光光度法原理样品中雌激素经盐酸水解为甾体缀合