DNA粗提取与鉴定实验.pptVIP

1.提取生物大分子的根本思路选用一定的或方法别离具有不同_______________的生物大分子。2.提取DNA的思路：利用DNA与、和等在 和性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。一、提取DNA的方法物理化学物理或化学性质RNA蛋白质脂质物理化学DNA粗提取与鉴定回扣根底知识点3.原理(1)DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的溶液中溶解度不同。利用这一特点，选择适当的就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以到达别离的目的。NaCl盐浓度

(2)能水解蛋白质，但对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受的高温，而DNA在以上才会变性。洗涤剂能瓦解，但对DNA没有影响。(3)DNA不溶于，但是细胞中的某些蛋白质那么溶于此溶液。酒精蛋白酶60～80℃80℃细胞膜4.DNA的鉴定在的条件下，DNA遇二苯胺会染成。注意二苯胺试剂要。沸水浴蓝色现配现用通常选用2mol/LNaCl溶液溶解细胞中的_________，此时杂质易沉淀；在0.14mol/LNaCl溶液中DNA溶解度_______，可使_________。DNA最小DNA析出

1.利用DNA的溶解特性粗提取DNA①DNA与蛋白质在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同。溶解特性质量浓度为2mol/LNaCl溶液质量浓度为0.14mol/LNaCl溶液DNA在NaCl溶液中，质量浓度为0.14mol/L时溶解度最小溶解析出蛋白质NaCl的质量浓度从2mol/L降低过程中，溶解度逐渐增大部分发生盐析溶解考点一DNA提取与鉴定原理

②DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质那么溶于酒精。利用这一原理，可将DNA与蛋白质进一步别离。NaCl溶液酒精(体积分数为95%的冷酒精)DNA不溶蛋白质NaCl溶液质量浓度从2mol/L逐渐稀释的过程中溶解度逐渐增大某些蛋白质可溶

思考：为提取到DNA，曾先后使用不同浓度的NaCl溶液，那么在质量浓度为2mol/LNaCl溶液及0.14mol/LNaCl溶液中应取滤液，还是滤得的固体物？在质量浓度为2mol/LNaCl溶液中DNA呈溶解状态，应取滤液，在质量浓度为0.14mol/LNaCl溶液中DNA溶解度极低，易析出，应取固体物。

2.利用DNA对酶、高温及洗涤剂的耐受性提取DNA(见下表)DNA蛋白质蛋白酶没影响水解高温80℃以上才会变性60～80℃会变性洗涤剂没影响瓦解细胞膜特别提醒(1)甲基绿可将DNA染成绿色，且不需水浴加热。二苯胺鉴定DNA属于颜色反响，需要水浴加热5min，可使DNA呈蓝色。(2)二苯胺试剂要现配现用，否那么二苯胺会变成浅蓝色，影响鉴定效果。

归纳DNA的粗提取原理及目的归纳基本原理方法目的DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，在质量浓度为0.14mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低溶于NaCl溶液中并稀释①NaCl溶液质量浓度为2mol/L时，DNA溶解，而部分蛋白质发生盐析而生成沉淀，通过过滤可除去部分蛋白质及不溶于NaCl溶液的杂质②当NaCl溶液稀释至质量浓度为0.14mol/L时，DNA析出，过滤可除去溶于NaCl中的部分蛋白质和其他杂质DNA不被蛋白酶所水解加入嫩肉粉嫩肉粉中含木瓜蛋白酶，水解蛋白质DNA不溶于酒精溶液加入冷却酒精(体积分数为95%)DNA析出，除去溶于酒精的蛋白质

1.蛋白酶能将蛋白质水解而使染色质中的DNA别离出来。以下药品可到达上述同一目的的是 ()A.蒸馏水 B.NaCl溶液C.NaOH溶液 D.盐酸2.(2013江苏)某同学用洋葱进行DNA粗提取和鉴定实验，操作错误的选项是()A.参加洗涤剂后用力进行快速、充分的研磨B.用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的DNAC.参加酒精后用玻璃棒轻缓搅拌D.加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热BA学以致用

3.关于DNA粗提取与鉴定实验的有关说法正确的选项是()A.充分溶解DNA的盐溶液是0.14mol/L的NaCl溶液B.实验中提取较纯洁的DNA利用了DNA不溶于酒精的特点C.对最后提取出DNA用二苯胺试剂鉴定时需用酒精灯直接加热D.实验操作过程中先后两次参加蒸馏水的作用相同4.以下关于DNA粗提取与鉴定的说法正确的选项是()A.析出DNA时要缓慢地加蒸馏水，当析出黏稠物时即不再加水B.在探究洗涤剂对植物