TCID50与moi值的计算分析和总结.docx

实验四 病毒感染力的滴定（TCID

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的测定）

一、实验目的

了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID

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的操作步骤、计算方法及含义。二、测定病毒感染力的方法

半数致死量LD(50%lethaldose)：用动物或鸡胚来检测

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半数鸡胚感染量EID

(egg50%infectivedose)：用鸡胚来检测

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半数细胞培养物感染量TCID（50%tissuecultureinfectivedose)：用细胞

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来检测

蚀斑形成单位（plaqueformingunit，PFU）：用细胞来检测三、材料

1、长满单层的细胞1瓶

2、胰酶、吸球、吸管、生长液

3、96孔细胞培养板

4、加样器、枪头

5、病毒液（PRV）

四、TCID

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的操作步骤

1、在青霉素瓶或离心管中将病毒液作连续10倍的稀释，从10-1-10-10。

2、将稀释好的病毒接种到96孔微量培养板中，每一稀释度接种一纵排共8孔，每孔接种100μl。

3、在每孔加入细胞悬液100μl，使细胞量达到2~3×105个/ml。

4、设正常细胞对照，正常细胞对照作两纵排。（100μl生长液+100μl细胞悬液）

5、逐日观察并记录结果，一般需要观察5-7天。

6、结果的计算，按Reed-Muench两氏