NADPH细胞色素 C 还原酶活性测定试剂盒说明书.docxVIP

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货号：MS2700 规格：100管/96样

NADPH-细胞色素C还原酶（NCR）活性测定试剂盒说明书

微量法

注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：

细胞色素P450酶是一组主要存在于肝脏的同工酶，在外源物质代谢中具有重要作用，尤其是药物和毒物的代谢。NCR作为P450酶系的重要一员，催化氧化型P450还原再生。

测定原理：

NCR催化NADPH还原氧化型细胞色素C，还原型细胞色素C在550nm处有特征吸收峰；通过测定550nm吸光度的增加速率，来计算NCR活性。

自备实验用品及仪器：

普通离心机，超速离心机、可调式移液枪、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。

试剂组成和配置：

试剂一：粉剂×2瓶，4℃保存。临用前根据用量每瓶加100mL蒸馏水充分溶解。试剂二：液体×1瓶，4℃保存。

试剂三：粉剂×1管，-20℃保存。临用前配制，加1.04mL蒸馏水充分溶解，4℃避光保存。

试剂四：粉剂×1管，4℃保存。临用前配制，加1100μL蒸馏水充分溶解，4℃保存。

粗酶液提取：

1、除去细胞核和线粒体等：称约0.5g组织，加入4℃预冷的1mL试剂一，冰上充分研磨，

10000g4℃离心30min，取上清液