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中国人乳β--酪蛋白克隆表达及功能分析的开题报告

题目：中国人乳β--酪蛋白克隆表达及功能分析

研究背景和意义：

乳β--酪蛋白是母乳中含量最高的蛋白质之一，对于新生儿的生长发育起到了关键的作用。之前的研究已经证明了乳β--酪蛋白具有多种生物活性，包括抗菌、免疫调节、生长发育、肠道营养等方面。目前，对于乳β--酪蛋白的功能研究主要集中在牛乳中的乳β--酪蛋白上，而关于中国人乳β--酪蛋白的研究相对较少。因此，本研究旨在在基于牛乳乳β--酪蛋白基础上，进一步对中国人乳β--酪蛋白进行深入研究，包括克隆、表达和功能分析，以期更全面地了解其生物活性和应用价值。

研究内容：

1.中国人乳β--酪蛋白的克隆：通过RT-PCR技术从新生儿乳汁中提取RNA，进行逆向转录，得到中国人乳β--酪蛋白的cDNA序列；利用PCR扩增技术将其放到表达载体上。

2.表达重组中国人乳β--酪蛋白：将表达载体转入大肠杆菌中，利用蛋白表达系统对其进行表达和纯化。

3.对中国人乳β--酪蛋白功能的评价：利用多种生物学方法对其抗菌、免疫调节、生长发育、肠道营养等方面的生物活性进行评价。

研究方法：

1.RNA提取：从新生儿乳汁中提取RNA。

2.RT-PCR反转录：用反转录酶逆向转录RNA，制备出cDNA。

3.PCR扩增：利用PCR扩增技术，将cDNA序列扩增到表达载体上。

4.转化大肠杆菌：将表达载体转入大肠杆菌中。

5.蛋白表达和纯化：利用蛋白表达和纯化技术，得到表达重组中国人乳β--酪蛋白。

6.生物活性评价：利用体外和体内实验，对中国人乳β--酪蛋白的多种生物活性进行评价。

研究进度：

1.RNA提取：已经完成。

2.RT-PCR反转录：已经完成。

3.PCR扩增：正在进行中。

4.转化大肠杆菌：计划在下个月完成。

5.蛋白表达和纯化：计划在今年内完成。

6.生物活性评价：计划明年进行。

研究预期结果：

1.成功克隆中国人乳β--酪蛋白的cDNA序列。

2.成功表达和纯化出表达重组中国人乳β--酪蛋白。

3.对中国人乳β--酪蛋白抗菌、免疫调节、生长发育、肠道营养等方面的生物活性进行评价。

4.更深入地了解中国人乳β--酪蛋白的生物活性和应用价值。

研究意义：

1.相对于牛乳中的乳β--酪蛋白，中国人乳β--酪蛋白更符合中国人口味，因此对于中国食品工业的开发具有重要的意义。

2.对于乳制品的开发具有重要的意义，可以引导乳制品行业研发更为营养丰富、更符合人体需求的产品。

3.对于加强中国婴幼儿营养保健方面具有重要的意义。

参考文献：

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[2]LeeHJ,KimJH,KimCH,etal.Applicationsofcaseinanditshydrolysateforfunctionalfood.DevReprod.2016;20(2):67-75.

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