河南农业大学考研专业课《现代分子生物学》考试试卷(147) .pdfVIP

河南农业大学考研专业课《现代分子生物

学》

课程试卷（含答案）

__________学年第___学期考试类型：（闭卷）考试

考试时间：90分钟年级专业_____________

学号_____________姓名_____________

1、分析题（5分，每题5分）

1.现要求以某一植物或动物组织cDNA为模板扩增A基因，并构建

该基因的重组表达质粒pET28aA，并在大肠杆菌BL21中进行表达。[宁

波大学2019研]

答案：（1）从组织中提取RNA的步骤如下：

①将组织在液氮中会磨碎，每50～100mg组织加入1mlTRIzol

裂解液溶解样品，充分吹打混匀。

②每1mlTRIzol加入2.0ml氯仿，剧烈震荡15s，室温放置

5min。

③4℃，10000g离心15min，此时RNA主要包括集中在水相中。

④将水相转移至新的离心管中，加入等体积环氧，室温放置

10min。

⑤4℃