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生化分离实验课程教学大纲

课程编号

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课程名称：生物化学分离实验BiochemicalSeparationExperiment

课程属性：选修实验属性：独立设课

开课学期：6学时：32

适用专业：生物工程学分：1.0

开课部门：化学与生物工程学院

考核要求：考查，实验报告占60%，实验操作占40%。

课程简介：

本课程是生物工程专业本科生的专业选修课程。学生在已有的生物化学实验

技能基础上，通过综合性更强的分离纯化实验，了解和掌握生物分离纯化的基本

原理及操作方法，并通过实验培养初步的科学研究思路及分析和解决问题的能

力。

一、实验项目设置及学时分配

实验开出学时

项目编号实验项目名称

类型要求分配

粗脂肪的提取和定量测定验证必做6

薄层层析法分离AMP、ADP、ATP验证必做3

溶菌酶的分离纯化综合必做6

SDS鉴定溶菌酶纯化产物的纯度综合必做6

小麦萌发前后淀粉酶的提取和活力测定验证必做4

离子交换柱层析分离核苷酸设计必做7

香菇水溶性粗多糖的提取综合选做6

小麦清蛋白的提取和性质研究综合选做16

学时总计32（不含选做内容）

二、实验内容及教学要求

实验项目1：粗脂肪的提取和定量测定

1、教学内容

（1）粗脂肪的索氏提取

（2）提取后的定量测定

2、教学目标

（1）了解索氏提取的原理

（2）掌握索氏提取法的基本操作技能

实验项目2：薄层层析法分离AMP,ADP,ATP

1、教学内容

（1）薄层层析法分离AMP、ADP、ATP

2、教学目标

（1）初步掌握薄层层析法的原理和操作要点

实验项目3：溶菌酶的分离纯化

1、教学内容

（1）卵清中溶菌酶的提取

（2）硫酸铵沉淀法进行溶菌酶的初步纯化

2、教学目标

（1）了解硫酸铵沉淀蛋白质的原理

（2）掌握硫酸铵分级沉淀的基本方法

实验项目4：SDS鉴定溶菌酶纯化产物的纯度

1、教学内容

（1）SDS-聚丙烯酰胺凝胶的制胶（老师演示实验）

（2）SDS分离溶菌酶纯化产物及分子量测定

2、教学目标

（1）掌握聚丙烯酰胺凝胶分离蛋白质的原理

（2）了解SDS法的基本操作过程

（3）了解SDS法判断样品纯度和分子量的原理和方法

实验项目5：小麦萌发前后淀粉酶的提取和活力测定

1、教学内容

（1）小麦种子中淀粉酶的提取

（2）小麦种子淀粉酶的活力测定

2、教学目标

（1）掌握淀粉酶提取和活性测定的原理和操作要点

（2）了解种子萌发前后相关酶活性的变化及代谢变化