细胞工程制药技术.pptVIP

3.细胞壁再生及细胞分裂：l-3天即再生新细胞壁，表现为体积增加、膨大，再由圆变椭圆。可用质壁分离法证实。也可用0.1%ST型或WBL型荧光增白剂染色，经前者染色，有细胞壁者在荧光显微镜下呈蓝色荧光。经后者染色，有细胞壁者发射绿色荧光。在原生质培养过程中，胞质增加，液泡减少，叶绿体或颗粒内含物分散于泡质中或围绕于细胞核周围．常在1一2周内发生第一次分裂。不同细胞分裂频率不同。第63页,共81页，2024年2月25日，星期天4、愈伤组织或胚状体形成原生质体再生的细胞一旦开始分裂，就可能继续生长：A形成细胞团，发育成愈伤组织；B.形成胚状体，再产生植株；C.形成愈伤组织，再形成胚状体。随着细胞分裂及细胞团形成，已与常规细胞和组织培养相同，故培养3—4周需添加含一定量低渗稳定剂的新培养基，以满足细胞的营养，亦利于细胞团及小愈伤组织的生长。第64页,共81页，2024年2月25日，星期天5.植株再生大多经愈伤组织诱导分化再生为完整植株。当愈伤组织达到1—2mm时，转移至分化培养基上诱导器官分化。分化培养基与原生质体培养基差别在于：(1)只用蔗糖为碳源，不加渗透稳定剂；(2)与原生质体培养基相反，细胞分裂素浓度高于生长素;(3)在诱导器官