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环境生物技术;第二章当代生物技术在环境污染
中应用;第一节当代生物技术概述;一、生物技术
生物技术(Biotechnology)是指利用生物有机体或组成部分发展新产品或新工艺一个技术体系。;生物技术依据和出发点:
生物在生长、发育与繁殖过程中进行物质合成、降解和转化能力。
生物技术关键基础是基因工程和细胞工程。
优越性:
不可取代
快速、准确
低耗、高效
副产物、副作用小
安全性好;二、当代生物技术发展;7.1.2、当代生物技术在环境科学中应用前景;第二节基因工程与环境污染
生物治理;7.2.1、基因工程分子生物学基础;7.2.2、基因工程基本过程;二、基因工程载体
要将一个外源基因送入受体细胞,需要有运输工具,这就是载体。
惯用载体有:质粒,噬菌体,动植物病毒。
质粒是基因工程最惯用载体。(农杆菌质粒)
(1)首先因为其上有某一限制酶单一切点,用同种酶切断外源DNA片段插入该质粒切口,就组成了重组DNA分子。
(2)其次因为质粒上有选择性标识,能够依据受体细胞是否含有该种标识来判断受体细胞是否取得了该重组质粒。所以质粒在基因工程中得以广泛应用。;三、目标基因分离
1、从基因组直接分离目标基因
惯用鸟枪法,用限制酶将某种生物DNA切成片段并分别加入载体,对受体细胞进行转化,让外源DNA全部片段都在宿主细胞中大量扩增,在筛选出有目标基因转化细胞。该法有一定盲目性,工作量大。
2、酶促合成法
将真核细胞基因转录全部RNA提取出来,在体外经反转录酶作用,生成与mRNA互补DNA,即cDNA,再将cDNA酶切后载入载体,建立cDNA文库,筛选出目标基因。或对已知核苷酸次序目标基因,经过聚合酶链反应(PCR)技术直接合成。
;四、目标基因与载体重组工艺
用同一个限制酶切割含有目标基因外源DNA和载DNA,产生相同粘性末端,在DNA连接酶作用下,形成完整重组DNA分子。
五、将目标基因导入受体
在体外完成DNA重组后,普通将重组DNA分子导入受体细胞让目标基因在受体细胞中表示。基因工程中惯用受体细胞是大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌和动植物细胞。;六、对目标基因筛选和检测
将目标基因在入载体,导入受体细胞后,必须对目标基因进行检测,确认细胞中以摄入重组DNA分子。检测方法普通有遗传学方法、原位杂交法和免疫学方法。
七、目标基因在受体细胞中表示
目标基因在受体细胞中表示,受到许多原因表示。
目标基因阅读框架必须与载体DNA启示密码相吻合。
要有适当开启子确保目标基因正确转录。
基因蛋白产物有时还需要经过修饰和加工才能成为有活性功效蛋白。
;7.2.3基因工程在环境生物处理中应用;主要应用:
环境监测(DNA探针)
抗病毒植物育种,降低农药使用量(螟虫水稻)
降解卤代芳烃基因工程菌
分解尼龙寡聚物基因工程菌
分解多糖基因工程菌
抗金属基因工程菌
除草剂降解基因工程菌
杀虫剂降解基因工程菌;基因工程在环境保护中应用;;石油污染方面
2.水和土壤污染方面
3.在温室效应方面
4.在农药方面;1、石油污染方面;1975年美籍印度人查克拉搏特等科学家依据似单胞杆菌对石油中有毒成份含有很强分解力这一特征,把4种能吃浮油假单胞杆菌基因拼接起来,合并成一个假单胞菌种.组成了所谓“超级菌”。
它能分解各种石油烃,消除浮油效率高、速度快,只需几小时就能除掉自然菌种需几年才能消除原油污染。经不停改进。这种超级细菌已成功地用于实际环境治理中。
;2、水和土壤污染方面;2.2当前,人们正在利用基因工程深入解析聚磷基因和硝化基因,将这2个基因重组后导人大肠杆菌中,构建重组工程菌,从而使废水中过高N、P得到有效地去除,降低水体富营养化,降低赤潮发生。
科学家已经用基因工程方法培养出了“吞噬”汞和降解土壤中DDT细菌,以及能够净化镉污染植物。;2.3美国加利福尼亚大学微生物学工作者培育出了一个以PCBs(聚氯联苯)为食物细菌。PCBs是一个污染环境致癌物质,它不能被普通自然过程破坏,这种从试验室中培育成细菌被认为是有效处理这一难题工具。
该大学研究人员是将一个普通土壤细菌(恶臭假单胞菌)两个菌株DNA进行交换,产生一个杂交突变菌株。该基因交换菌株能破坏联苯基,而联苯基正是组成PCBs分子一个关键基因,它由两个苯环组成,有剧毒,在它们紧密结合时便成为潜在致癌物。;;PCBs进入人体后,不能被人体新陈代谢过程破坏,且能传给下一代。这种物质也能长久保留在土壤中不会被分解。新培育出这种两个菌株遗传物质发生交换突变菌株则能分解PCBs,可使这种有毒害物质变成无害物质——水、二氧化碳和盐类。
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