贝克曼流式细胞仪原理及软件介绍.pptxVIP

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贝克曼流式细胞仪原理及软件介绍贝克曼流式细胞仪原理及软件介绍第1页

BeckmanCoulter流式细胞仪发展史1947年WallaceCoulter创造了库尔特原理,用于血细胞分析1953年推出了世界上第一台流式细胞分析仪CoulterCounterModelA1972年推出世界上第一台激光流式细胞仪EPICSII1975年研制出世界上第一台带计算机流式细胞仪1997年推出世界上第一台单激光四色数字化流式细胞仪EPICSXL/MCL年首先将高精度数字化颜色赔偿技术ADC(AdvancedDigitalCompensation)应用于流式平台,引领流式进入全新全矩阵赔偿、全自动赔偿和脱机赔偿时代年推出世界上第一台单激光五色流式细胞仪FC500/MCL,年升级为FC500/MPL年推出世界上第一台含有EV参数同时进行无成本绝对计数多功效细胞分析系统QuantaSC,将流式细胞术与库尔特原理完美结合,年推出MPL进样系统年收购Dako企业Moflo和Cyan,使Beckman企业成为高端流式市场领导者年,推出世界是第一台三激光十色分析型流式细胞仪Gallios/Navios贝克曼流式细胞仪原理及软件介绍第2页

EPICSXL-ADCQUANTASCCytomicsFC500BeckmanCoulterCelllabFamilyMoFloXDPGallios/NaviosCyanADP贝克曼流式细胞仪原理及软件介绍第3页

FC500硬件贝克曼流式细胞仪原理及软件介绍第4页

Whatisflowcytometry?流式细胞术是单个细胞/颗粒流过检测装置过程中,检测到物理和/或化学特征。HowardShapiro,PracticalFlowCytometry,3rdEdition贝克曼流式细胞仪原理及软件介绍第5页

分类分析型:只能分析用,液流进入废液筒分选型:回收目标细胞,用于后续试验。要求管道绝对无菌。贝克曼流式细胞仪原理及软件介绍第6页

基础原理流路(液流系统)流动室 鞘液SHEATH样本流SAMPLE单细胞悬液5*105~1*106个/ml光路(光学系统)光源滤片光电倍增管PMTHV电路(电路系统)放大电路HV及GAIN增益A/D转换分析系统:计算机贝克曼流式细胞仪原理及软件介绍第7页

液流系统贝克曼流式细胞仪原理及软件介绍第8页

流路结构贝克曼流式细胞仪原理及软件介绍第9页

流路单细胞悬液大多数仪器是在50-300μm大小孔径中,将细胞悬液注射进入鞘液中这一过程,成为流体动力学聚焦贝克曼流式细胞仪原理及软件介绍第10页

FLOWCELLInjectorTipFluorescencesignalsFocusedlaserbeamSheathfluid贝克曼流式细胞仪原理及软件介绍第11页

光路系统贝克曼流式细胞仪原理及软件介绍第12页

光路结构贝克曼流式细胞仪原理及软件介绍第13页

光路光源检测信号散射光信号 FS:前向角散射光 SS:侧向角散射光(90度散射光)荧光信号 荧光染料 光学滤片贝克曼流式细胞仪原理及软件介绍第14页

光路光源 与经过细胞聚焦在同一点上激光 空冷 488nmblue,633nmred,325nmUV,514nmgreen,空冷/水冷EnterpriseII水冷Innova300系列 Innova70系列贝克曼流式细胞仪原理及软件介绍第15页

常见激光器及其通道分配表贝克曼流式细胞仪原理及软件介绍第16页

检测信号贝克曼流式细胞仪原理及软件介绍第17页

散射光信号—前向散射光(FS)FS----Forward(AngelLight)Scatter 在激光束正前方检测器,为前向散射光检测器FS强度与细胞或其它颗粒大小,形状及opticalhomogeneity相关FS用于检测细胞或其它粒子表面属性 如:大小贝克曼流式细胞仪原理及软件介绍第18页

FALSSensorLaser前向散射光贝克曼流式细胞仪原理及软件介绍第19页

前向散射光贝克曼流式细胞仪原理及软件介绍第20页

散射光信号–侧向散射光SS-Side(AngelLight)Scatter 与激光束垂直方向检测器为侧向检测器,也称为90度散射光检测器SS用于检测细胞内部结构 如:胞浆内颗粒多少,核质比贝克曼流式细胞仪原理及软件介绍第21页

FALSSensor90LSSensorLaser侧向散射光贝克曼流式细胞仪原理及软件介绍第22页

侧向散射光贝克曼流式细胞仪原理及软件介绍第23页

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