胚胎干细胞及其培养建系专家讲座.pptxVIP

胚胎干细胞及其培养建系;干细胞(stemcells,SC);按分化潜能：

全能干细胞

多能干细胞

单能干细胞

;胚胎干细胞;;胚胎干细胞及其培养建系专家讲座;胚胎干细胞及其培养建系专家讲座;胚胎干细胞应用前景;胚胎干细胞应用前景;胚胎干细胞应用前景;胚胎干细胞培养建系方法;1.胚胎采集

分离含有发育全能性ES细胞,要求选择适当阶段胚胎。采卵时普通取囊胚。;2.ICM获取

从着床前胚泡中分离内细胞团,是从早期胚胎建立ES细胞系先决条件

直接分离法

免疫外科法

延迟着床法;;3.内胚团离散

分离ICM时可用吸管将其从滋养层细胞上转移到胰蛋白酶微滴中,大约3～5分钟ICM细胞彼此解离。;4.胚胎干细胞判定

惯用检测指标有碱性磷酸酶、OCT24、细胞特异性表面抗原

(SSEA2l)等。

测定胚胎干细胞体内分化能力是经过制备嵌合体来完成。;5.培养

有喂养层培养体系

胚胎干细胞是动物个体发生过程中含有全能性原始细胞,维持ES细胞不分化状态由细胞内一些结构蛋白和多肽因子进行内源性调控。体外培养ES细胞,接种在喂养层细胞上培养时能够长时间保持ES细胞原初特征。用作喂养层细胞多数是含有贴附能力细胞(如成纤维细胞、子宫内皮细胞等)

无喂养层培养体系

喂养层细胞分泌因子难以支持一些ES细胞增殖。ES细胞也可在无喂养层细胞环境中建立和维持,培养液中添加LIF因子或使用能分泌LIF细胞制备条件培养液均可

;胚胎干细胞系不但是研究细胞分化模型,也是研究一些前体细胞起源和细胞谱系演变较理想试验体系。;THANKYOU