蛋白质含量的测定.pptVIP

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地球的自转方向:自西向东,从北极上空观察作逆时针转动,从南极上空观察作顺时针转动。周期:约为24小时。地理意义:产生昼夜更替,使物体在水平方向的运动发生偏移(如傅科摆),时区的划分。知识点小结练习题1:图上的A,B,C,D四地中,即将进入黑夜的是();即将进入白天的是();已处在白天的是();已处在黑夜的是();图中的圆心应是地球的()极。为什么?ABCD答案:ACDB北极练习题21地球自转的方向是(),如果从北极上空看,地球作()时针方向旋转,从南极上空看,地球作()时针方向旋转。自转一周所需时间大约为()小时。地球自转的旋转中心是()A太阳B北极星C地轴D赤道因地球自转产生的现象是()A季节变化现象B昼夜现象C极昼极夜现象D昼夜交替现象练习题3地球表面产生昼夜现象的主要原因是()A地球是一个不透明的球体B地球时刻不停的绕轴自转C地球不停的绕太阳公转D地轴与赤道面有一个夹角晨昏线(圈)是()A深夜与黎明的界线B昼半球与夜半球的界线C东西半球的界线D南北半球的界线想想说说如果我们居住的地球是透明的?如果地球不会自转?如果地球自转一周的时间发生变化。如果……我们的世界会变得怎样??实验四、蛋白质含量的测定考马斯亮蓝G250法,紫外吸收法一、基本原理利用某些物质的分子吸收紫外光、可见光、红外光和激光200~800nm光谱区的辐射来进行定性定量分析和物质结构分析测定的方法。称为分光光度法或分光光度技术,使用的仪器称为分光光度计。这种分光光度计灵敏度高,测定速度快,应用范围广,其中的紫外/可见分光光度技术更是生物化学研究工作中必不可少的基本手段之一。紫外区可分为紫外(近紫外)和真空紫外(远紫外)。由于吸收池(又称样品池、比色杯等)和光学元件以及氧气能吸收小于190nm波长的光,因此常规紫外测定集中在近紫外区,即200nm-400nm。可见光区为400nm-800nm。测定某物质的紫外吸收光谱的曲线,可与已知标准的紫外光谱图相对照,对照时须注意测定的条件,如溶剂、浓度等。常用标准的紫处吸收光谱是萨德勒研究实验公司编制的“Sadtler”紫外标准图谱集,到七十年代末为止已收集28585个化合物紫外光谱图,此外还有药物和非极性溶剂紫外光谱图2000多幅。由于化合物紫外吸收峰较少,而且峰形都很宽,不象红外光谱是许多指纹峰,所以在用紫外吸收光谱进行化合物定性鉴定时,应注意:化合物相同,其紫外光谱应完全相同;但是紫外光谱相同不一定化合物就相同,可能仅是存在某些相同的发色团或基团,因此在鉴定时应与红外光谱相结合。Beer-Lambert定律朗伯-比尔光吸收定律:A=-lgT=εbcA:吸光度,又称光密度“O.D”。T:透光度,T=I/I。(I。为照射到吸收池上的光强,I为透过吸收池的光强)ε:摩尔吸光系数或克分子吸光系数(L·mol-1·cm-1)。b:样品光程(cm),通常使用1.0cm的吸收地,b=1cm。c:样品浓度(mol/L)。由上式可以看出:吸光度A与物质的吸光系数“ε”和物质的浓度“C”成正比。摩尔吸光系数:,是物质对某波长的光的吸收能力的量度。ε越大,吸收光的能力越强,相应的分光度法测定的灵敏度就越高。ε值越大,说明电子跃迁的几率大,通常ε=10-105:一般认为ε>104为强吸收;ε=103-104为较强吸收;ε<102为弱吸收,此时分光光度法不灵敏。因为通常使用分光光度计可检测出的最小吸光度A=0.001,所以,当b=1cm,ε=105时,可检测的溶液最小浓度是C=10-8mol/L。吸光度“A”有一个重要性质是其具有加和性:即混合物的总吸光度等于溶液中的各组份各自在该波长下吸光度的算术和。这是多元混合物分光光度法定量分析的基础。若溶液中各溶质的吸光系数ε相同,则各溶质吸光度的大小与溶质浓度成比例。例一:尿嘧啶核苷酸溶液用1cm石英吸收池测定260nm处的吸光度为0.650,用同一吸收池测定纯溶剂的吸光度为0.070,计算尿嘧啶溶液的摩尔浓度,已知其摩尔吸光系数=8.2×103M-1cm-1(M=mo

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