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微孔板杂交法对肾综合征出血热早期诊断的应用研究的开题报告

开题报告

一、研究背景及意义

肾综合征出血热（hemorrhagicfeverwithrenalsyndrome，HFRS）是一种由主要传媒动物小鼠等啮齿类动物携带的汉坦病毒引起的全球性卫生问题，该病在我国是一种主要的传染病之一。对于HFRS的诊断，临床症状、实验室指标和病毒学检测都具有缺陷。微孔板杂交法（microarrayhybridization）是一种新型的NucleicAcidsmicroarray检测技术，该技术敏感性高、速度快，可以实现多重病原体的检测，且能够快速得到基因型特征，因此被广泛应用于微生物学等生命科学领域。本研究旨在探究微孔板杂交法对HFRS早期诊断的应用，为该病的临床治疗提供新的检测手段。

二、研究内容

本研究将从以下几个方面进行：

1.建立微孔板杂交法HFRS检测体系。通过对不同HFRS病原体直接获取的核酸进行扩增、标记和杂交反应，建立HFRS微孔板杂交检测体系，优化检测条件，以获得最佳的检测效果。

2.建立HFRS微孔板杂交法检测标准。选择一批已知HFRS危险因素的人群，采集其血样，使用微孔板杂交法进行检测，并与其他已经确定为HFRS阳性的标准检测方法进行比较，确定HFRS微孔板杂交法检测标准。

3.应用微孔板杂交法进行HFRS早期检测。对于初次发病的患者，应用微孔板杂交法进行HFRS早期检测，并与临床观察和实验室检测结果进行比对，评估微孔板杂交法对HFRS早期诊断的作用。

三、研究方法

1.收集已知HFRS危险因素的人群血样，通过血清学和分子生物学方法检测HFRS病原体，包括病毒的特异性抗体、病毒标志物法和PCR扩增法等。

2.将HFRS病原体的核酸片段扩增、标记后用于微孔板杂交，使用专业仪器（如AgilentG2565Micoscanner）读取杂交信号，根据微孔板杂交法差异位置的基因型特征进行病原体的识别。

3.对HFRS患者进行微孔板杂交法诊断，按照标准进一步进行实验验证和比对，最终得出诊断结果。

四、研究预期成果

1.成功建立基于微孔板杂交法的HFRS检测体系，并且能够快速准确地检测HFRS病原体。

2.确认微孔板杂交法HFRS检测标准，为该病的早期诊断提供标准化的检测手段。

3.评估微孔板杂交法应用于HFRS早期诊断的敏感性和特异性，探索一种新型的HFRS诊断方法，为临床治疗提供新的支持。

五、研究进度

本研究计划在2021年5月开始，2022年5月完成。主要研究内容和时间安排如下：

1.第一季度（2021年5月~2021年8月）：收集HFRS患者临床资料、建立微孔板杂交检测方法，并对检测条件进行初步优化。

2.第二季度（2021年9月~2021年11月）：采集HFRS患者和健康人群样本，正式进行微孔板杂交检测，并确定微孔板杂交法HFRS检测标准。

3.第三季度（2021年12月~2021年3月）：对初次发病的HFRS患者进行微孔板杂交检测，与标准检测方法进行比对，确定微孔板杂交法HFRS早期诊断的敏感性和特异性。

4.第四季度（2022年3月~2022年5月）：统计、分析数据，撰写研究成果，完成论文撰写与论证。