【医学免疫学实验】抗酸染色与墨汁负染实验.ppt

目录末页*《医学微生物学》实验五一、抗酸染色法二、墨汁负染色法目的抗酸染色观察结核分枝杆菌的形态。一、抗酸染色法原理分枝杆菌属的细菌细胞壁脂质含量较高，特别是其中大量分枝菌酸可影响染料穿入。一旦着色后不易被盐酸酒精脱色。一、抗酸染色法材料结核病人的痰液标本、抗酸染色液试剂盒、试管夹、玻片等。一、抗酸染色法一、抗酸染色法方法1.涂片制备挑取痰液→在玻片上涂成痰膜(厚膜片:取标本2-3次)→干燥→固定。一、抗酸染色法方法2.染色⑴初染：石炭酸复红染液和加速剂2-3滴（1min)⑵脱色：盐酸酒精脱至无色⑶复染：碱性美兰2-3滴（1min)每一步骤结束后用水冲洗、甩干，复染后干燥再用油镜观察。一、抗酸染色法结果结果观察:抗酸阳性菌为红色抗酸阴性菌为蓝色一、抗酸染色法结果报告方式（直接涂片法）仔细观察300视野(观察时间不少于4min)，未发现抗酸杆菌。士：可疑。发现抗酸菌l～2条／300视野。1+：发现抗酸菌3～9条／100视野。2+：发现抗酸菌1～9条／10视野。3+：发现抗酸菌1～9条／每视野。4+：发现抗酸菌≥10条／每视野。集菌法涂片应按“发现细菌”或“未发现细菌”报告二、墨汁负染色法目的墨汁负染色法观察新型隐球菌的形态。原理新型隐球菌的荚膜较厚，一般不易着色，同时菌体折光性较强，用墨汁负染色法可在黑色背景下看到透亮的菌体。二、墨汁负染色法二、墨汁负染色法材料1.菌种新型隐球菌2.试剂优质墨汁3.其他载玻片、盖玻片、镊子、普通光学显微镜目录末页*