生物反应器的检测及控制.ppt

8.PH的检测最通用的pH测定仪是复合pH电极，因其具有结构紧凑，可蒸汽加热灭菌的优点。第31页,共58页，2024年2月25日，星期天复合PH电极结构第32页,共58页，2024年2月25日，星期天复合PH电极为了使PH电极适应工业发酵生产的要求，通常加装不锈钢保护套才能插入发酵罐中使用。具有温度补偿系统。在每批发酵灭菌操作前后进行标定。通常PH计的测定范围是0～14，精度达10.05～0.1PH，响应时间数秒至数十秒，灵敏度为0.1PH。第33页,共58页，2024年2月25日，星期天9．溶氧浓度的检测通常用溶氧电极法，其化学基础是氧分子在阴极上还原，因而有电流产生，所产生的电流和被还原的氧量成正比，故设法测定此电流值就可确定发酵液的溶氧浓度。第34页,共58页，2024年2月25日，星期天溶氧电极实际上，用一层高分子膜使电极与被测溶液分隔开，具有如下特点：（1）氧分子扩散透过膜是限速步骤，故测出的电流值与溶氧浓度成正比；（2）温度变化1℃，则产生4％的变化，故必须装设温度补偿线路；（3）电流值和氧的扩散系数与溶解度的乘积成正比关系；（4）这类溶氧电极的阳极面积应比阴极面积大得多，这样可减小误差。第35页,共58页，2024年2月25日，星期天溶氧电极溶氧电极的溶氧值有两种表示方法，即饱和溶氧的百分数和溶氧值，前者最常用。值得注意的是，测定时要使电极周围的液体适度流动，以加强传质，尽量减小与电极膜接触的液膜滞流层厚度，并减少气泡和生物细胞在膜上积存，以保证溶氧测定的准确。第36页,共58页，2024年2月25日，星期天10．溶解CO2浓度的检测测定原理利用对CO2分子有特殊选择渗透通过特性的微孔膜，使扩散通过的CO2进入饱和碳酸氢钠缓冲溶液中，平衡后显示的pH与溶解的CO2浓度成正比，由此原理并通过变换就可测出溶解CO2浓度。第37页,共58页，2024年2月25日，星期天溶解CO2浓度的检测溶解CO2浓度测定仪的工作原理和pH计类似不同点是电极内装了饱和的碳酸氢钠溶液，在高温灭菌时会部分分解，故要每次灭菌后均需校准才能测定。第38页,共58页，2024年2月25日，星期天11．氧化还原电位（ORP）的检测检测原理：基于溶液中的金属电极上进行的电子交换达到平衡时，具有相应的氧化还原电位值，此值与溶液的PH和温度有关。溶液的氧化还原电位值不仅取决于溶氧值，还与温度T和PH有关。目前常用的氧化还原电极的检测范围在一700～＋700mV，灵敏度110mV，响应时间数十秒至数分钟，精度为±0.1l％FS。第39页,共58页，2024年2月25日，星期天12．排气的氧分压和CO2分压的检测（1）排气的氧分压的检测：气体中氧浓度的检测，主要有磁氧分析、极谱电位法和质谱法。磁氧分析仪的检测原理：氧是顺磁性的，它的磁化率较大，在所有气体中占有重要地位；而大多数气体具有抗磁性，而且有较小的磁化率。第40页,共58页，2024年2月25日，星期天磁氧分析仪结构原理图第41页,共58页，2024年2月25日，星期天（2）排气中CO2分压的检测常用的排气中CO2分压（浓度）检测仪为红外线二氧化碳测定仪和二氧化碳电极。红外线二氧化碳分析仪原理：CO2的红外吸收峰在2.6～2.9×103和4.1～4.5×103nm之间。在上述两个波段的近红外线通过含有CO2的气体时，光强度衰减，其衰减量依从Lambert－Beer的规则。第42页,共58页，2024年2月25日，星期天通气发酵罐排气检测流程图l.粗滤器2.膜片泵3.贮气瓶4.除水器5.流量计6.精过滤器7.CO2检测仪8.氧分析仪第43页,共58页，2024年2月25日，星期天13．细胞浓度测定生物细胞浓度的测定有全细胞浓度和活细胞浓度之分。（1）全细胞浓度的测定：可分湿重法、干重法、浊度法、湿细胞体积等。以准确度来说，干重法最好，但其余三种方法简便易行，节省时间，有利于生产过程的监测控制，尤其是对发酵流加操作和连续操作过程。第44页,共58页，2024年2月25日，星期天在线检测对于生物反应器在线检测用的生物传感器或普通的传感器，必须尽可能满足下述要求：①响应要连续、迅速；②灵敏度应在0.02g/L以上；③电极本身对生物细胞无影响；④检测过程对细胞无损伤，不必加药物；⑤可检测含固体微粒营养物质的发酵液；⑥易于清洗、灭菌。第45页,共58页，2024年2月25日，星期天细胞浓度在线检测浊度计流通式浊度计第46页,共58页