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本发明涉及食品致病菌检测技术领域，旨在提供一种基于CRISPR‑Cas12a‑RAA技术检测奶粉中呕吐型蜡样芽孢杆菌的方法。包括：在蜡样芽孢杆菌基因中寻获特异性片段为靶标序列，并以此为基础完成相应引物、模板的设计工作；建立CRISPR‑Cas12a‑RAA反应体系，利用RAA引物针对待测样品DNA模板进行RAA恒温扩增，通过crRNA与Cas12a形成的二元复合体特异识别扩增产物中的靶标双链DNA，进而激活Cas12a非特异切割反应体系中的荧光探针；针对反应产物进行荧光检测；如荧光强度信号为阳性
(19)国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号CN117887872A
(43)申请公布日2024.04.16
(21)申请号202410191681.8C12R1/085(2006.01)
(22)申请日2024.02.
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