实验 菠菜中色素的提取与分离.docx

实验４ 菠菜中色素的提取与分离

【实验目的】１．学会用有机溶剂提取菠菜中的色素并进行分离，了解从植物中提取有机化合物的一般方法；２．学会根据物质的性质选择合适的溶剂，知道选用混合溶剂是提取物质的有效途径；３．了解利用纸色谱法分离物质的原理和操作。

【实验原理】

菠菜中含有多种色素，如叶绿素（绿色）、胡萝卜素（橙黄色）、叶黄素（黄色）等。１．菠菜中色素的提取

叶绿素a、叶绿素b和胡萝卜素易溶于石油醚，叶黄素易溶于乙醇，石油醚和乙醇可以混溶。因此，可以选择石油醚—乙醇混合溶剂来提取菠菜中的色素，然后用水洗去乙醇和少量易溶于水的杂质，这样就可得到色素的石油醚溶液。

２．色素的分离

提取菠菜色素得到的石油醚溶液可用纸色谱法分离：将少量含有几种物质的溶液涂在滤纸条的一端，并在这一端用适当的溶剂（称为展开剂）润湿，在滤纸的毛细作用下，展开剂携带待分离的物质沿滤纸纤维向上移动。由于不同的组分的移动速度不同，一段时间后，不同的组分移动的距离不同，从而达到将这些组分分离开来的目的，如下图所示。这种分离方法称为纸色谱法，又叫纸上层析。

【实验器具】

试剂：石油醚、乙醇，丙酮、无水硫酸钠、脱脂棉。

仪器：研钵、锥形瓶、漏斗、铁架台（带铁圈）、分液漏斗、大试管。

【实验过程】

一、菠菜中色素的提取

１．研磨：取１0g菠菜切成小块，用研钵捣烂，装入锥形瓶中。２．浸取：向锥形瓶中加入１0mL石油醚—乙醇混合溶剂（体积比为１：１），塞上橡胶塞，振荡。３．过滤：将小团棉花放在漏斗颈部，过滤浸取液（如图１）。

４．洗涤：将滤液移人分液漏斗，用１0mL水洗涤两次，以除去乙醇及浸取液中的少量水溶性物质。注意不要剧烈振荡，以防止乳化；静置分层（如图２），弃去下层（水—乙醇层），将上层（石油醚层）溶液移至干燥的小锥形瓶中。

注意：洗涤后，下层水层从下口放出，上层有机层从上口倒出。５．干燥：加入少量无水硫酸钠，干燥，备用。

图１ 图２

二、色素的分离

１．裁纸：取一张滤纸裁成１．５cm×２0cm的长方形，注意使滤纸纤维呈竖直走向。２．点样：在距滤纸的一端约２cm处，用铅笔画一条直线作为起点线，用毛细管吸取菠菜中色素的提取液在起点线中部点样，并使斑点尽可能小。如果色斑颜色很浅，待溶剂完全挥发后，再吸取提取液重新点在同一位置上。３．展开：溶剂完全挥发后，用大头针将滤纸的另一端钉在橡胶塞上。将滤纸点样一端向下直立于盛有展开剂（体积比为8：１的石油醚—丙酮混合试剂）的大试管中（滤纸应浸入展开剂，展开剂的液面应低于

色斑），塞紧橡胶塞，静置，观察展开过程。

４．晾干：当展开剂上升至距滤纸上沿约１cm处时，取出滤纸，用铅笔在展开剂前沿处画一条线。晾干后，仔细观察每个色斑的位置。

从上到下，四个斑点依次是：胡萝卜素（橙色）→叶黄素（黄色）→叶绿素a（蓝绿色）→叶绿素b（黄绿色）。

用纸色谱法分离色素

【思考讨论】１．菠菜中色素的提取与分离实验中应注意哪些方面的问题？

２．请你归纳从植物中提取某些成分的一般方法以及应该考虑的问题。

【联想质疑】

自主反思

自主反思

教师解惑

【提升训练】

１.绿叶研磨后过滤，漏斗基部应放（ ）

Ａ．纱布

Ｂ．棉花

Ｃ．单层尼龙布

Ｄ．滤纸

２.从叶绿中提取色素，选取的最佳叶片应是（

）

Ａ．肥嫩多汁

Ｂ．革质叶片

Ｃ．刚刚长出来的小嫩叶

Ｄ．鲜嫩、色浓绿的叶片

３．叶绿素不溶于（ ）

Ａ．水 Ｂ．石油醚出

Ｃ．丙酮 Ｄ．苯

４．提取和分离叶绿体中色素的正确顺序是（

）

Ａ．剪碎绿叶→研磨→过滤→滤液画线→纸层析

Ｂ．剪碎绿叶→研磨→加SiO２、CaCO３→过滤→滤液画线→纸层析Ｃ．剪碎绿叶→研磨→滤纸过滤→色素滤液→滤液画线→纸层析Ｄ．剪碎绿叶→研磨→过滤→滤液→滤液画线→铅笔画线→纸层析

５．研磨绿叶时加入少量SiO２的目的是（

）

Ａ．使叶绿素充分溶解

Ｃ．防止叶绿素被破坏

Ｂ．将绿叶研磨充分

Ｄ．阻止叶绿素挥发

6．