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受体细胞的选择
野生型细菌一般不能用作基因工程的受体细胞
✓对外源DNA的转化效率较低
✓可能存在潜在的致病性
✓对其他生物种群存在感染寄生性
➢必须通过诱变手段对野生型细菌进行遗传性状改造，以获得
适宜作为受体细胞的突变菌株。
受体细胞应具备的条件：
1限制缺陷型
2重组缺陷型
3易于转化或转导
4遗传互补型
5感染寄生缺陷型
1限制缺陷型
限制与修饰系统是维持野生型细菌种属特异性的保护
系统，其限制与修饰作用分别由限制性核酸内切酶和修饰
甲基化酶来完成。
限制修饰系统是导致外源
重组DNA转化或转导效率低
下的主要原因之一。
应选用限制系统缺陷型的突变菌株作为受体细胞，
以提高外源DNA分子的转化或转导效率。
e.g.大肠杆菌限制系统主要由hsdR基因编码，hsdR基因
突变的菌株丧失降解外源DNA能力。
限制缺陷型（hsdR-
）
2重组缺陷型
在野生型细菌中，进入细胞的外
源DNA分子能自发地与染色体DNA
发生体内同源重组。
基因工程是建立在DNA重组分子
自主复制的基础上，因此受体细胞必
须选择体内同源缺陷型的遗传表型。
e.g.大肠杆菌自发重组过程由rec基因家族的编码产物所控制。
✓RecA蛋白能促进DNA分子之间的同源联会和DNA单链交换。
•recA基因突变使大肠杆菌细胞内的遗传重组频率降低10-6倍。
✓RecBCD蛋白具有双链DNA外切酶和单链DNA内切酶活性。
•recB、recC和recD基因的突变也可以降低遗传重组频率。
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重组缺陷型(recA，recB，recC)
3易于转化或转导
利用遗传诱变技术改变受体菌细胞壁的通透性及细胞
膜的特异吸附性，从而提高其转化效率。
e.g.噬菌体DNA载体构建的重组DNA分子转染大肠杆菌
时，受体细胞要有噬菌体特异性受体，如膜蛋白LamB。
4遗传互补型
受体细胞必须具有与载体所携带的选择标记互补的遗传性状。
e.g.在大肠杆菌系统中，重组质粒载体上多含有Amp抗性标
记基因，则所选用的受体细胞应对这种抗生素敏感。
r
(Amp)
s
(Amp)
5感染寄生缺陷型
防止重组细菌扩散污染
➢很多细菌对其他生物（尤其是人和牲畜）具有感染和寄生
效应，重组DNA分子导入这些细菌受体后，极可能随细
菌的感染寄生进入生物体内，并广泛传播。若外源基因对
人体和牲畜有害，则会导致一场灾难。
➢因此从安全的角度考虑，受体细胞应为感染寄生缺陷型。
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